Identificación y Caracterización de Nuevas Mutaciones en el Gen de la Tiroperoxidasa Humana. Análisis Predictivo del Efecto de las Mismas Sobre la Estructura Proteica.

BELFORTE, FIORELLA SABINA; OLCESE, MARÍA CECILIA; CITTERIO, CINTIA; GONZÁLEZ SARMIENTO, ROGELIO; TARGOVNIK , HÉCTOR MANUEL; RIVOLTA, CARINA MARCELA

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

La tiroperoxidasa (TPO) es una hemoproteína de membrana involucrada en la biosíntesis de hormonas tiroideas. El 10% de los casos de hipotiroidismo congénito con bocio corresponden a defectos en la organificación de yodo y están asociados a mutaciones en los genes de TPO o en aquellos vinculados con la generación de H2O2 (Sistema DUOX). Con el objeto de identificar distintas mutaciones en el gen de TPO, evaluar su efecto deletéreo y desarrollar nuevas herramientas diagnósticas, se analizó una población de pacientes con hipotiroidismo congénito, bocio y test de descarga de perclorato positiva. Para ello se aisló ADN genómico a partir de sangre periférica y se amplificaron por PCR los 17 exones de TPO incluyendo las regiones intrónicas flanqueantes. Los productos fueron analizados por SSCP y secuenciados aquellos con migración diferencial respecto de controles. Se identificaron cinco nuevas mutaciones: c.796C>T, p.Q266X(exón 7); c.2000G>A, p.G667D(exón 11), c.1874 G>A, p.R595K(exón 11); c.2242 G>A, p.V748M(exón 13) y g.IVS16 -2 A>C(intrón 16). Así mismo, dos mutaciones ya descriptas c.1186_1187insGGCC, p.R396fsX472(exón 8) y c.2421insC, p.C808fsX879(exón 14) fueron evidenciadas. Se procedió al análisis de predicción de la estructura secundaria proteica de las tiroperoxidasas mutadas, al modelado molecular de las mismas y al análisis del grado de conservación evolutiva respecto a tiroperoxidasas normales de distintas especies. Adicionalmente se identificaron siete nuevos polimorfismos: c.769G>T, p.A257S(exón 7), c. 1772 C>T, p.T561M(exón 10), c.1998C>T, p.D666D(exón 11), c.2286 C>T, p.R762R(exón 13), c.2513 C>T, p.S811F(exón 14), gIVS11 +20 G>A(intrón 11) y gIVS13 + 59 C>T(intrón 13). Las técnicas de biología molecular empleadas resultan de utilidad para la comprensión de la fisiopatología del hipotiroidismo neonatal de alta prevalencia y para mejorar su diagnóstico asegurando el asesoramiento genético a las familias afectadas y el tratamiento adecuado.