Análisis molecular del gen de TPO en defectos de organificación del Yodo.

BELFORTE, FIORELLA S.; OSORIO LARROCHE, CAROLINA; OLCESE, MARÍA C.; CITTERIO, CINTIA E.; TARGOVNIK , HÉCTOR M.; RIVOLTA, CARINA M.

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

Los defectos de organificación de yodo representan el 10% de los casos de hipotiroidismo congénito (HC), el cual posee una prevalencia de 1/2200 y un modo de herencia autosómico recesivo. Con el objeto de extender la búsqueda de nuevas mutaciones en el gen de tiroperoxidasa (TPO) se estudió una población de 40 pacientes con diagnóstico de HC, bocio y test de descarga de perclorato positivo. Se amplificaron por PCR el promotor y los 17 exones de TPO y sus regiones intrónicas flanqueantes. Los productos fueron analizados por SSCP y aquellos con migración diferencial fueron secuenciados. Para el estudio de delecionesduplicaciones se realizó MLPA y Long-PCR. Mediante estudios ?in silico? se evaluó la estructura 2ria y 3ria de las proteínas mutadas y se exploró su grado de conservación evolutiva en distintas especies. Las nuevas variantes se evaluaron poblacionalmente por SSCP y RFLP. Se encontró un paciente doble heterocigota para la mutación conocida 1187insGGCC; p.R396fsX472(exón 8) y para una nueva mutación: c.1772 C>T, p.T561M(exón 10). Otro caso presentó una nueva mutación heterocigota c.2332G>A, p.V748M(exón13) en cis con una deleción de exón 12 completo en el alelo paterno y variante rara de secuencia c.2006 A>G p.M706V(Exón 12) en el materno. Un tercer paciente evidenció la mutación c.2332G>A, p.V748M(exón13) en cis con la mutación descripta c.2505_2511insC, p.C808LfsX879(exón 14), evidenciando por MLPA una duplicación de exón 9 completo en el alelo alternativo. Se encontró también un paciente con una única mutación heterocigota descripta c.2395 G>A, p.E799K. Adicionalmente se hallaron dos polimorfismos descriptos: c.2263 A>c, p.T755P; c.2376 C>T, p.R762R y uno nuevo g.IVS 12 +16 c>t. Las técnicas de biología molecular empleadas constituyen una herramienta útil para la comprensión de la fisiopatología molecular del hipotiroidismo neonatal. Por otra parte contribuirán al diagnóstico temprano y al adecuado asesoramiento genético a las familias afectadas.