Galectina-1 sensibiliza linfocitos T humanos en reposo a la muerte celular mediada por FAS (CD95): mecanismos subcelulares involucrados

PAOLA MATARRESE, GERMÁN A. BIANCO, ANTONELA TINARI, ELIZABETH MORMONE, WALTER MALORNI, GABRIEL A. RABINOVICH

Mar del Plata (Argentina)

Congreso; Primer Reunión de Sociedades Biomédicas y LII Reunión Anual de la SAI; 2004

Foro de Sociedades Biomédicas Argentinas

  Recientemente demostramos la capacidad de galectina-1 (Gal-1) de inducir apoptosis de linfocitos T (LT) activados. El objetivo del presente trabajo fue investigar la potencial asociación entre Gal-1 y la apoptosis de LT mediada por Fas/FasL y explorar los mecanismos involucrados. A tal fin LT purificados de sangre periférica (en reposo y activados con IL-2/PHA) fueron tratados con distintas concentraciones de Gal-1 por diferentes períodos de tiempo en presencia y ausencia de IgM anti-Fas. Se observó un incremento en los niveles de apoptosis en aquellos LT en reposo o activados sometidos a la acción del anticuerpo anti-Fas en presencia de Gal-1 (61% vs 44% LT activados; 37% vs 4% LT en reposo). Este incremento fue dosis-dependiente cuando se añadieron al cultivo concentraciones de Gal-1 entre 20 y 100 mg/ml. A los fines de determinar los eventos intracelulares implicados, se analizó el potencial de membrana mitocondrial (PMM) en presencia de Fas luego de 72hs de exposición a Gal-1, encontrándose un incremento del mismo (p<0.01) en forma tiempo-dependiente que muestra una hiperpolarización temprana seguida de una despolarización tardía. Un análisis paralelo de activación de caspasas demostró que el tratamiento con Gal-1 induce la activación de caspasa-8, 9 y 3 (p<0.01). Utilizando inhibidores específicos se observó participación de la vía de ceramidas en este fenómeno. Los cambios morfológicos de la mitocondria, se analizaron por microscopia electrónica de transmisión observándose coalescencia y fisión de las mismas después de 18 hs de exposición a Gal-1. Finalmente por microscopia confocal se encontró un incremento de la expresión de h-Fis (molécula asociada a fisión mitocondrial) y cambio de localización de la proteína DRP-1. El presente estudio reporta la primera asociación entre Gal-1 y la muerte celular asociada a Fas/FasL, lo cual provee una base racional para las propiedades inmunorreguladoras de Gal-1 en modelos experimentales de inflamación crónica y cáncer.