INVESTIGADORES
OUBIÑA Jose Raul
congresos y reuniones científicas
Título:
Diversidad molecular extrema de los genomas del virus de la hepatitis B (HBV) en una infección HBeAg negativa
Autor/es:
LÓPEZ JL, MATHET VL, OUBIÑA JR, CAMPOS RH
Lugar:
Vaquerías, Pcia. de Córdoba, Argentina
Reunión:
Jornada; XXIV Jornadas Científicas anuales de la Sociedad Argentina de Virología; 2004
Resumen:
DIVERSIDAD MOLECULAR EXTREMA DE LOS GENOMAS DEL VIRUS DE LA HEPATITIS B (HBV) EN UNA INFECCIÓN HBe Ag NEGATIVA. López JL, Mathet VL, Oubiña JR, Campos RH. Cát. De Virología, Fac. de Farmacia y Bioquímica, UBA, Depto. Microbiología, Fac. de Medicina, UBA, Buenos Aires, Argentina.      La infección crónica por el HBV es un factor importante para la progresión hacia la enfermedad hepática terminal. La diversidad y variabilidad de los genomas virales son determinantes principales de la persistencia viral. Previamente hemos comunicado estudios sobre la cocirculación de mutantes puntuales y de deleción en un infectado crónico HBe Ag (-) en tres muestras durante un lapso de 3 años (RI –RIII). Con el objetivo de profundizar el estudio sobre la estructura y dinámica de los genomas virales se obtuvo la secuencia nucleotídica de 20 clones  (10 pertenecientes a R I y 10 a RIII) hemigenómicos (1791 nt que abarcan el extremo carboxilo del gen S hasta el final del gen Core). Trece de los 20 clones fueron diletantes parciales. Los resultados más destacables son: 1) la secuencia de los clones reafirmó la distribución  y frecuencia de las mutaciones en las secuencias directas; 2) los 20 clones mostraron 42 posiciones con cambios nucleotídicos consistentes (presentes en al menos 2 genomas) que a su vez produjeron 34 cambios aminoacídicos); 3 ) los clones de RI mostraron mezcla de secuencias pre-Core en posición 28 salvajes y/o mutante stop; 4) 11/13 clones deletantes carecieron al menos la mitad carboxilo terminal de la proteína X; 5) 10/13 clones perdieron el dominio de RNAsa H; 6) 6/13 deletantes perdieron la señal de encapsidación€; 7) 2/13 perdieron parcialmente la región del core rica en arginina que interactúa con el pregenoma; 8) el borde 3´de las deleciones de 7/13 clones mapea entre las posiciones 1815-1820. Desde el punto de vista técnico, el análisis de 10 clones a partir de cada muestra fue suficientemente sensible como para disecar las ambigüedades y los cambios nucleotídicos entre las secuencias directas de RI y RIII. Sólo fueron sometidos al análisis los cambios nucleotídicos consistentes para minimizar los errores de las polimerasas in vitro. La factibilidad de “salto” de la Taq durante la PCR fue descartada por el análisis de la estructura secundaria del templado en las condiciones de la reacción. En resumen, la estructura primaria de los genomas observada aquí no ha sido previamente publicada y sugiere una extremada diversidad de funciones virales alteradas. Además se desconocen los mecanismos de generación de las deleciones y el compartimiento anatómico o celular de su origen.