Neutralización de la actividad biológica anti-viral in vitro del IFN-alfa2b mediante mAbs

CASALIS, P.; ETCHEVERRIGARAY, M.; OGGERO EBERHARDT, M.; KRATJE, R. B.

Esperanza. Pcia. de Santa Fe. Argentina

Jornada; VII Encuentro de Jóvenes Investigadores de la Universidad Nacional del Litoral; 2003

Secretaría de Ciencia y Técnica – Secretaría de Bienestar Universitario de la Universidad Nacional del Litoral. Federación Universitaria del Litoral

El interferón-alfa humano (hINF-alfa) es un polipéptido relativamente pequeño producido bajo 16 formas moleculares diferentes, entre los que se encuentra el INF-alfa2b. Entre las diversas funciones del IFN-alfa se destacan la actividad anti-viral, inmuno-moduladora y anti proliferativa. Debido a estas propiedades se lo utiliza como agente terapéutico en el tratamiento de infecciones virales y un gran número de patologías tumorales y enfermedades en donde el sistema inmunitario se encuentra comprometido. A pesar de las propiedades terapéuticas de esta citoquina, la liberación excesiva del IFN alfa endógeno constituye un mecanismo muy perjudicial para el huésped. Muchos de los síntomas característicos de las enfermedades virales agudas, como la fiebre, convulsiones, mialgia, fatiga, pérdida de peso, efectos inmunosupresores en médula ósea que se traducen en anemia, leucopenia y/o plaquetopenia, son causadas por una sobreproducción del IFN-alfa. Los efectos adversos de la liberación del IFN alfa endógeno no sólo se han detectado en los procesos infecciosos agudos de origen viral sino también en un gran número de enfermedades autoimnunes y desórdenes inflamatorios, incluyendo el lupus eritematoso sistémico, la diabetes tipo I, artritis reumatoide, esclerosis múltiple, anemia aplástica, el SIDA y enfermedades de inmunodeficiencia combinada severas. En determinadas situaciones patológicas la neutralización de la actividad biológica del IFN- alfa constituye un efecto beneficioso para el paciente. Por lo tanto, basados en la búsqueda de disminuir o suprimir los síntomas generados por la liberación incrementada de esta citoquina, se propone la obtención de fragmentos scFv recombinantes anti IFN alfa2b con el fin de ser utilizados para modular o bloquear las actividades biológicas del mismo. En una primera instancia del trabajo se preparó un panel de mAbs anti hIFN- alfa2b recombinante (rhIFN alfa2b) y se evaluó la capacidad neutralizante de la actividad biológica anti viral in vitro de la citoquina en presencia de los mismos. De acuerdo con los resultados obtenidos, puede concluirse que los mAbs con mayor capacidad neutralizante de la actividad biológica anti-viral in vitro del rhIFN-alfa2b fueron el mAb CB27H2 y el mAb CA1A3. Posteriormente, se evaluará la capacidad neutralizante de los mAbs sobre la actividad biológica anti-proliferativa in vitro del IFN alfa2b. De esta manera, se comparará la habilidad neutralizante de los anticuerpos a nivel de dos actividades biológicas diferentes manifestadas por la citoquina.