Producción, purificación y caracterización de nuevas variantes hiperglicosiladas de eritropoyetina humana recombinante

DORELLA, A.; AMADEO, I. ; KRATJE, R.; BÜRGI, M.; OGGERO, M

Santa Fe

Encuentro; XX Encuentro de Jóvenes Investigadores de la Universidad Nacional del Litoral; 2016

Universidad Nacional del Litoral

En los últimos años, la producción de bioterapéuticos ha adquirido gran relevancia frente a las drogas sintéticas. Los mismos son producidos en sistemas biológicos y presentan diferencias importantes en cuanto a su tamaño, estructura, potencia biológica, farmacocinética y farmacodinamia.La eritropoyetina (EPO) es una glicoproteína que forma parte de las citoquinas tipo I y se caracteriza por su importante actividad pleiotrópica. Es uno de los principales reguladores de la eritropoyesis y actúa sinérgicamente con otras moléculas para promover la proliferación, diferenciación y supervivencia de los progenitores celulares de linajes eritroides y mantener la masa de eritrocitos circulantes. Por tal motivo, la EPO, como bioterapéutico, es ampliamente utilizada para el tratamiento de la anemia provocada por la insuficiencia renal crónica. Asimismo, desarrolla múltiples funciones: citoprotección, vasculogénesis y angiogénesis [Brines y col., 2006; Arcasoy, 2010].La EPO humana (hEPO) está compuesta por una cadena de 166 aminoácidos con una masa molecular aproximada de 30400 Da. Presenta un sitio de O-glicosilación (Ser126) y tres de N-glicosilación (Asn24, Asn38 y Asn83) [Krantz y col., 1991]. Estos glicanos presentan un rol fundamental a nivel de la actividad biológica de la molécula, considerando su tiempo de vida media en circulación y su unión al receptor.El empleo de diversas técnicas de ingeniería genética ha permitido el desarrollado de variantes similares a la hEPO, con mayor grado de glicosilación, con el objetivo de incrementar su vida media en plasma. Esto se traduce en una reducción del número de dosis en el tratamiento de la anemia.Por otra parte, en la producción de bioterapéuticos, la purificación de las moléculas es una etapa crítica. Desarrollar estrategias que permitan obtener la molécula con un alto grado de pureza en pocos pasos de purificación, permitirá diseñar un proceso de producción que cumpla con los atributos de calidad exigidos.