Desarrollo de un fragmento de anticuerpo recombinante de cadena única (scFv) para la optimización del proceso de purificación de la hormona folículo estimulante humana recombinante (rhFSH)

MARÍA FERNANDA AGUILAR; GUILLERMINA FORNO; RICARDO KRATJE; MARINA ETCHEVERRIGARAY; MARCOS OGGERO

Buenos Aires

Jornada; XII Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial (JORFYBI 2015); 2015

Asociación Argentina de Farmacia y Bioquímica Industrial (SAFYBI)

La hormona folículo estimulante humana (hFSH) juega un rol importante en la regulación y mantenimiento de los procesos reproductivos. Cuando se encuentra en bajas concentraciones, debido a una disminución en su síntesis o secreción, genera problemas de infertilidad, que pueden ser revertidos mediante la administración terapéutica de hFSH.Actualmente, se produce hFSH recombinante (rhFSH) a partir de células CHO (del inglés, Chinese Hamster Ovary), y su purificación se realiza mediante cromatografía de inmunoafinidad, utilizando anticuerpos monoclonales (mAbs) anti rhFSH como ligandos bioespecíficos inmovilizados en una matriz. Con este fin, en nuestro laboratorio se han generado hibridomas productores de mAbs anti rhFSH. Sin embargo, la preparación de estos mAbs en cantidad necesaria para purificar la hormona con fines terapéuticos, resulta dificultosa, costosa, demanda mucho tiempo e implica el cultivo de células en presencia de suplementos de origen bovino. Una alternativa para salvar estos obstáculos es la obtención de un fragmento variable de anticuerpo de cadena única (scFv) (del inglés, single-chain variable fragment), formado por la unión covalente de las regiones variables de la cadena pesada (VH) y liviana (VL) del correspondiente mAb, mediante un péptido linker, y expresado como una única cadena proteica en bacterias. Generalmente, este scFv presenta una afinidad similar al anticuerpo original y posee la capacidad de conferir al proceso ventajas tecnológicas y operativas, tales como: la facilidad en su producción (ya que puede ser expresado en células procariotas), menor costo y tiempo del proceso, y la eliminación del uso de productos de origen animal lo que se traduce en un aumento del perfil de seguridad viral del producto final. Asimismo, es posible obtener rendimientos similares, o superiores, a los alcanzados mediante la producción habitual de mAbs. Por lo tanto, el objetivo general de este trabajo consiste en la obtención de un scFv, a partir de un hibridoma murino productor de un mAb anti-rhFSH, con la finalidad de optimizar el proceso productivo de esta hormona terapéutica recombinante.