Humanización de un fragmento de anticuerpo anti-IFN-a2b destinado al uso terapéutico

CAROLINA ATTALLAH; MARINA ETCHEVERRIGARAY; ANDREA MARANHAO; MARCOS OGGERO EBERHARDT

Buenos Aires

Jornada; XII Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial (JORFYBI 2015); 2015

Asociación Argentina de Farmacia y Bioquímica Industrial (SAFYBI)

En el último tiempo se ha demostrado la importancia del IFN-a en el Lupus Eritematoso Sistémico (LES). La liberación excesiva de esta citoquina por el propio organismo, influencia el desarrollo y la progresión de esta patología, e incide en sus manifestaciones clínicas. Existen varias líneas de investigación que relacionan al IFN-a como un potencial agente causante de esta enfermedad autoinmune, incluso se ha reportado que altos niveles de esta citoquina en suero constituyen un factor de riesgo hereditario para contraer LES. Por esta razón, la terapia con anticuerpos recombinantes anti-IFN-a es considerada como una estrategia terapéutica frente a esta patología. La generación de líneas celulares que expresen moléculas de anticuerpos monoclonales resulta dificultosa ya que se debe co-transfectar las células con vectores que codifiquen ambas cadenas, pesada y liviana, y se debe optimizar la expresión de cada una de ellas. Por lo que resulta más eficiente la expresión de las proteínas de fusión a Fc, compuestas por las regiones variables de un anticuerpo, fusionadas por una secuencia linker, y dicha estructura fusionada a su vez a la región Fc de las inmunoglobulinas, las que constituyen una única cadena polipeptídica (scFv‑Fc) que mantiene las propiedades de un anticuerpo completo. Las proteínas terapéuticas se producen principalmente en células CHO (del inglés, Chinese Hamster Ovary), ya que se encuentran muy bien caracterizadas y poseen la capacidad de glicosilar tales moléculas en forma semejante al patrón que presentan las proteínas humanas. Un problema asociado con los anticuerpos monoclonales radica en su potencial inmunogenicidad al ser administrados a pacientes. Los primeros anticuerpos empleados con fines terapéuticos fueron de origen murino, y desde ese momento se ha estado trabajando en reducir el riesgo inmunogénico de estas moléculas. Las estrategias empleadas son la generación de moléculas quiméricas, humanizadas y totalmente humanas, incrementando progresivamente la proporción de secuencias humanas que constituyen los anticuerpos. Otro factor de inmunogenicidad es el tipo de células utilizadas para su expresión. En función de estas evidencias, en el desarrollo de este trabajo nos proponemos generar moléculas anti‑IFN‑a2b del tipo scFv-Fc humanizadas, para su utilización como agentes terapéuticos en enfermedades relacionadas con un aumento excesivo de la producción endógena de IFN-a, como el LES. La tecnología empleada para generar estas moléculas constituye un gran aporte al sector productivo del país, ya que se refiere a la posibilidad de elaborar en Argentina un producto con superlativo contenido tecnológico.