Neutralización de una colección heterogénea de moléculas de IFN-alfa humano mediante un fragmento scFv recombinante

DEPETRIS, M.; OGGERO EBERHARDT, M.; KRATJE, R. B.; ETCHEVERRIGARAY, M.

Buenos Aires. Argentina

Congreso; Biolatina 2006 - VII Feria-Congreso Latinoamericano de Biotecnología y III Congreso Argentino de Biotecnología; 2006

Foro Argentino de Biotecnología

El incremento de la concentración de interferón alfa humano (hIFN alfa) en sangre se correlaciona con procesos infecciosos agudos de origen viral, desórdenes inflamatorios y varias enfermedades autoinmunes donde la citoquina actuaría como responsable del inicio o mantenimiento de la patología. Teniendo en cuenta la importancia del uso terapéutico de los anticuerpos monoclonales (mAbs) en la actualidad, se considera el IFN alfa un blanco atractivo para la terapia basada en anticuerpos. En este trabajo, se obtuvo un panel de 11 mAbs de origen murino utilizando como inmunógeno rhIFN alfa2b. Posteriormente, considerando parámetros tales como constante de afinidad, inhibición de la actividad biológica in vitro del IFN alfa y reconocimiento de diferentes áreas moleculares de la citoquina, se seleccionaron 4 mAbs para la obtención de fragmentos scFv recombinantes. El fragmento denominado CA5E6, de similar afinidad al anticuerpo murino original, neutralizó en ensayos in vitro un amplio espectro de moléculas de IFN alfa. Entre ellas, las citoquinas humanas recombinantes IFN alfa2a e IFN alfa2b y una colección heterogénea producida tras la activación de leucocitos y células Namalwa. Adicionalmente, este fragmento mostró capacidad para neutralizar el rhIFN alfa2b en ensayos realizados in vivo. En consecuencia, habiendo establecido la habilidad del fragmento CA5E6 para neutralizar una amplia diversidad de moléculas de IFN alfa, se lo considera un potencial candidato para el tratamiento de enfermedades como el lupus eritematoso sistémico, la esclerosis múltiple y la artritis reumatoidea.