Efecto de la glicosilación sobre la estabilidad de un derivado hiperglicosilado de interferón alfa humano recombinante

CEAGLIO, N.; OGGERO EBERHARDT, M.; ETCHEVERRIGARAY, M.; KRATJE, R. B.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Argentina

Congreso; I Congreso Latinoamericano de Farmacia y Bioquímica Industrial - XII Congreso Argentino de Farmacia y Bioquímica Industrial ? X Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2009

Asociación Argentina de Farmacia y Bioquímica Industrial

Los interferones (IFNs) constituyen una familia de citoquinas que poseen un amplio rango de propiedades biológicas, incluyendo actividad antiviral, antiproliferativa e inmunomoduladora. Por este motivo, el IFN-alfa2b humano recombinante (rhIFN-alfa2b) obtenido en E. coli (IFN-NG) constituye el tratamiento de elección para una amplia variedad de enfermedades virales y tumorales. Sin embargo, la efectividad del mismo es limitada debido a su rápida eliminación de la circulación, requiriendo el uso de dosis altas y frecuentes para mantener los niveles terapéuticos adecuados, las cuales son responsables de sus numerosos efectos adversos. Previamente, hemos construido y caracterizado una muteína de rhIFN-alfa2b altamente glicosilada (IFN-4N) obtenida mediante la introducción de cuatro sitios potenciales de N-glicosilación utilizando mutagénesis sitio-dirigida. Dicha variante mostró una notable mejora de sus propiedades farmacocinéticas (vida media plasmática 25 veces superior con respecto a la proteína no glicosilada) que permitió el mantenimiento de concentraciones plasmáticas estables, resultando en una superior actividad antitumoral in vivo en animales de experimentación. Sin embargo, la glicoingeniería de proteínas farmacéuticas puede proveer ventajas adicionales no sólo de relevancia biológica sino también de gran importancia durante las diferentes etapas de un proceso productivo, durante el cual se encuentran expuestas a diferentes factores ambientales que pueden comprometer su actividad biológica. En el presente trabajo se evaluó la influencia de la glicosilación sobre la estabilidad del IFN-4N sometido a diversas condiciones de estrés en comparación con su contraparte no glicosilada Los resultados obtenidos demuestran que el IFN-4N no sólo presenta propiedades mejoradas en términos de eficacia terapéutica con respecto a la citoquina no glicosilada, sino que además exhibe una mayor estabilidad in vitro. Esto representa una importante ventaja durante todas las etapas del proceso productivo, incluyendo el aislamiento, purificación y conservación a largo plazo del fármaco.