Nuevas líneas reporteras para evaluar la actividad biológica DE LOS INTERFERONES DE TIPO I

MARÍA DE LOS MILAGROS BURGI; CLAUDIO PRIETO; MARINA ETCHEVERRIGARAY; RICARDO KRATJE; MARCOS OGGERO EBERHARDT; MARIELA BOLLATI-FOGOLÍN

Montevideo

Congreso; 7as. Jornadas de la Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular; 2011

Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular de Uruguay

Dado el importante rol que cumplen los interferones (IFNs) en el sistema inmune de defensa, sus potencias deben ser correctamente identificadas para ser empleados como agentes biofarmacéuticos. Con este objetivo, se desarrollaron 4 líneas celulares de diferente origen tisular (A549, Hela, Wish y HEp-2) reporteras de la actividad de los IFNs de tipo I (IFN-alfa e IFN-beta), utilizando el gen de la proteína de fluorescencia verde (eGFP) bajo el control del promotor Mx-2 inducible por IFN. El mencionado promotor respondió específica y cuantitativamente a tales citoquinas demostrando una buena correlación entre la expresión de eGFP y las moléculas ensayadas. Por otro lado, no se observaron diferencias significativas en los límites de detección al comparar las respuestas de las distintas líneas celulares frente a los subtipos de IFN-alfa. Contrariamente, se verificaron variaciones en tales límites al comparar la actividad de los subtipos de IFN-beta en las líneas HEp-2. Por lo tanto, mediante la utilización de las líneas celulares apropiadas se podrá llevar a cabo la estandarización de diferentes ensayos genes reporteros para medir la potencia de los IFNs de tipo I. Estos sistemas presentarán ventajas con respecto a los ya existentes: rapidez, sensibilidad, especificidad y seguridad, siendo útiles además, para evaluar el modo en que los IFNs desarrollan su actividad en los diferentes tejidos humanos.