Identificación y caracterización de compuestos sintéticos inhibidores de la actividad biológica del IFN-alfa humano

BURGI, MARÍA DE LOS MILAGROS; PRIETO, CLAUDIO; PORRO, VALENTINA; ETCHEVERRIGARAY, MARINA; KRATJE, RICARDO; CABRERA, N; HERNÁNDEZ, P; CERECETTO, H; GONZÁLEZ, M; OGGERO, MARCOS; BOLLATI-FOGOLÍN, MARIELA

Montevideo

Jornada; 8vas. Jornadas de la Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular (SBBM, SUB); 2013

Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular (SBBM, SUB)

Diversas patologías, en particular, el lupus eritematoso sistémico han demostrado una producción excesiva de interferón-alfa (IFN-alfa), responsable de los síntomas exhibidos por tales enfermedades. Por este motivo, resulta importante identificar moléculas que puedan inhibir la actividad de la citoquina. En nuestro laboratorio, se obtuvo la línea celular WISH-Mx2/eGFP reportera de la actividad biológica de los IFNs de tipo I de origen humano (hIFNs-I, entre ellos, el hIFN-alfa), con la cual se analizaron 88 compuestos sintéticos pertenecientes a la Quimioteca del Grupo de Química Medicinal. La línea reportera contiene la construcción Mx2/eGFP, donde la secuencia de la proteína reportera eGFP se encuentra bajo el control del promotor Mx2, inducible por IFNs-I. De esta forma, fue posible correlacionar directamente la expresión de células verdes con la cantidad de IFN presente en la muestra. Empleando esta línea, se comparó la expresión de eGFP en presencia y ausencia de compuestos buscando aquellos que bloqueen tal expresión como consecuencia de la inhibición de la actividad de los hFNs-I. Se lograron identificar 10 compuestos que fueron caracterizados mediante el estudio de su toxicidad, dosis efectiva, efecto sobre la actividad biológica antiviral y antiproliferativa de los hIFNs-I y análisis de su efecto sobre el ciclo celular y apoptosis. Finalmente, el efecto combinado de 5 de ellos, sobre la actividad de los IFNs-I fue evaluado mediante el ensayo de gen reportero, observándose un efecto cooperativo para inhibir la actividad biológica de los hIFNs-I, acción que fue corroborada mediante ensayos de actividad antiviral y antiproliferativa.