Desarrollo de una estrategia de purificación de proteínas utilizando un péptido bifuncional

LEOPOLD, MJ.; OGGERO EBERHARDT, M.; CEAGLIO, N.

Santa Fe

Jornada; Encuentro de Jóvenes Investigadores de la UNL; 2021

Universidad Nacional del Litoral

En nuestro laboratorio hemos diseñado un péptido de 15 aminoácidos denominado mGMOPcomo etiqueta para la preparación de proteínas de fusión. Esta etiqueta deriva de la región Nterminaldel factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humano (hGM-CSF) yse caracteriza por dos propiedades. Por un lado, presenta una elevada probabilidad de Oglicosilación,con 6 sitios potenciales para la unión de O-glicanos; y, por otro lado, contiene unepitope lineal en su N-terminal (secuencia APAR) reconocido por un mAb (CC1H7), tambiénobtenido en un-estro laboratorio (Oggero y col., 2004). Ambas características determinan labifuncionalidad del péptido mGMOP, que puede ser utilizado simultáneamente para conferirpropiedades biológicas mejoradas a las proteínas de fusión por su capacidad de híper-Oglicosilación,y como sistema para la cuantificación y/o purificación de las mismas. En trabajosprevios se logró fusionar la etiqueta mGMOP a la región N-terminal del interferón-α2brecombinante humano (rhIFN-α2b), exhibiendo la quimera mGMOP-IFN una mejora significativaen sus propiedades farmacocinéticas con respecto al rhIFN-α2b no modificado (Sales y col.,2021). En el presente trabajo, se propuso evaluar el potencial de la etiqueta como herramientapara la purificación de proteínas, explotando el aumento de la afinidad que se produce en lainteracción mAb CC1H7-mGMOP en presencia de alta fuerza iónica.