Empleo de distintos péptidos señales para expresión de proteínas recombinantes en células HEK293, NS0 y CHO-K1

ATTALLAH, C; ETCHEVERRIGARAY, M.; OGGERO, M.

FABICIB - Revista de la FBCB/UNL

Universidad Nacional del Litoral

Lugar: Santa Fe; Año: 2015 vol. 19 p. 138 - 140

La demanda de proteínas terapéuticas recombinantes se expande significativamente. La mayoría de los bioterapéuticos son anticuerpos monoclonales, los cuales se producen generalmente en células animales debido a la necesidad de incorporar modificaciones postraduccionales semejantes a las de las proteínas humanas. Existe, por lo tanto, una constante necesidad de incrementar la productividad de las líneas celulares empleadas para su obtención mediante el desarrollo de modificaciones que optimicen su producción. Por un lado, las células CHO (Chinese Hamster Ovary) son las más utilizadas para tal fin, aunque también se emplean otros tipos de células, como HEK (Human Embrionic Kidney) y NS0 de mieloma de ratón. Por otro lado, los péptidos señales (SPs), capaces de dirigir eficazmente la secreción de proteínas, son elementos claves en la producción de proteínas recombinantes ya que la secreción de proteínas es uno de los pasos limitantes en la productividad de las células animales. Hasta el momento, los estudios realizados para evaluar la eficiencia en la secreción de diferentes SPs se han focalizado en el empleo de células CHO, por lo que resulta atractivo evaluar y comparar dicha eficiencia en otros tipos de células de mamífero. En este trabajo, empleando tres tipos de líneas celulares y diferentes SPs, se evaluó la expresión de GFP (green fluorescent protein) y de un fragmento de anticuerpo de formato scFv (single-chain variable fragment) fusionado a la región Fc1 de la IgG humana. Tales proteínas fueron empleadas como entidades reporteras del efecto que los diferentes SPs producen a nivel de la productividad de las proteínas recombinantes expresadas en los huéspedes celulares seleccionados.