Congelamiento de embriones de pejerrey bonaerense (Odontesthes bonaerensis) mediante microinyección de una solución crioprotectora

MACORETTA CL; ASSELBORN I; MORENO ACOSTA O; MIRANDA LA

Corrientes

Simposio; V Simposio Argentino de Ictiología.; 2017

RESUMENTeniendo en cuenta que el pejerrey bonaerense es un desovador múltiple estacional (primavera) y que posee una gran importanciaeconómica, es conveniente implementar biotecnologías que optimicen el manejo desu reproducción en cautiverio. En este sentido, el objetivo de este trabajo fuedesarrollar un protocolo de congelamiento de embriones. Para ello, serecolectaron embriones de las instalaciones de la Estación Hidrobiológica deChascomús, y se seleccionaron aquellos que presentaban vesículas ópticas sinpigmentar. Los embriones fueron microinyectados en el vitelo o en el espacioperivitelino con 32nl de solución crioprotectora (Sc; Metanol 10%v/v; DMSO10%v/v, Sacarosa 10%p/v, NaCl 5g/l) empleando el microinyector Nanoject II(Drummond). Para ello las agujas se confeccionaron empleando capilares devidrio estirados en un solo paso a 53°C con el equipo PC-10 Puller (Narishige).Para evidenciar la microinyección, se utilizó Phenol Red 0,5% KCl 100mM a razón de 1μl de este colorante por cada10μl de Sc. Finalmente, los embriones fueron expuestos a 1ml de la Sc en criovialesdurante 10min a 0°C (temperatura de equilibrio) y sometidos a un congelamientorápido (-0,11±0,03°C/s) hasta -20°C, temperatura a la que fueron almacenadosdurante 1 hora. El descongelamiento se realizó en un baño termostatizado a 30°Cdurante 1 minuto y se les realizaron 3 lavados con 5ml de agua de incubación.Los embriones fueron incubados hasta su eclosión en una incubadora programablea 20°C con un fotoperíodo 12h L: 12h O. Se obtuvieron porcentajes de eclosióndel 26,25% para los embriones microinyectados en el vitelo; del 53,74%, paralos embriones microinyectados en el espacio perivitelino; del 70%, para losembriones congelados sin haber sido microinyectados previamente; y del 90%,para los embriones control. Estos resultados preliminares muestran que esposible congelar embriones de pejerrey y establecen las bases para ensayosfuturos en el área.