INVESTIGADORES
MIRANDA Leandro Andres
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de técnicas de congelamiento de embriones de pejerrey (Odontesthes bonariensis).
Autor/es:
DEL FRESNO P; MIRANDA LA
Lugar:
Chascomús
Reunión:
Jornada; XV Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología.; 2013
Resumen:
En
este trabajo se evaluó la supervivencia de embriones de
pejerrey al congelamiento a -14,
-19 y -30°C utilizando un congelador programable. Se utilizaron embriones en
estadio de desarrollo inicial (I:>128 células), medio (M: vesículas ópticas)
y tardío (T: ojos pigmentados) usando como crioprotectores mezclas de Metanol
(M), Dimetil Sulfóxido (DMSO) y Etilenglicol (E) con sacarosa (S) al 10 y 20%.
Luego de 1h a -14°C los embriones I (DMSO 10% + S 20%) mostraron un 80% de supervivencia,
los M (M 10% o DMSO al 20 % + S 20%) un 100% y los T (M 10% o E 20% + S 20%) un
85%. Usando los mismos protocolos se congelaron directamente embriones T a -19°C
durante 1h. El tratamiento con E resultó en un 90% de supervivencia. Posteriormente,
embriones T se mezclaron con G 70% + M 20% + DMSO 10% (A) o G 50% + M 30% + E 20% (B) y se congelaron a
-30 (0,56°C/min). Luego se almacenaron a -20°C durante 1, 4, 6 y 24 hs.
La mayor supervivencia se obtuvo con el protocolo B (100%) luego de 4 hs de
congelamiento. No se encontraron embriones viables luego de 6 y 24 hs de
congelamiento.