Efecto de la proteína X del virus hepatitis B (HBV) sobre MDR1, MRP1 y BCRP: potenciales nuevas implicancias en la hepatitis B crónica, la oncogénesis viral y la terapéutica.

CUESTAS, ML; .; CASTILLO, AI;; GENTILE, EA; ; DELFINO, MC; ; OUBIÑA, JR; ; MATHET, V

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

Introducción. El carcinoma hepatocelular (HCC) representa el 4% de los tumores de todo el mundo y la quinta causa de cáncer en el hombre. Cerca del 80% de los pacientes con HCC se encuentra crónicamente infectado con el virus Hepatitis B (HBV).La proteína X del HBV desempeña un rol principal en la oncogénesis hepática, y su triple mutante (I127T/ K130M /V131I) exhibe una actividad transactivadora mayor que la salvaje, contribuyendo significativamente a la hepatocarcinogénesis. Las proteínas ABC son bombas transmembrana que transportan sustratos en contra del gradiente de concentración. La sobreexpresión de algunos de sus miembros- como MDR1, MRP1 y BCRP- está asociada a la resistencia a múltiples drogas. La sobreexpresión de algunos de estos miembros (MDR1 y MRP1) está asimismo asociada con la inhibición de la vía intrínseca de la apoptosis y el cáncer. Objetivo. Analizar el efecto de la expresión de la proteína X salvaje (Xsal) y de la triple mutante (Xmut) del HBV sobre los niveles de ARNm de mdr1, mrp1 y bcrp, así como sobre los niveles de expresión de las proteínas homónimas. Diseño del Estudio. La línea celular Huh7 fue transfectada con plásmidos que codifican para la proteína Xsal o Xmut del HBV. Al cabo de 24 y 72 h. de expresión transitoria, los niveles de ARNm y de proteína de los genes mdr1, mrp1 y bcrp fueron evaluados mediante RT-qPCR y Western Blot, respectivamente. Resultados. Se observó: (i) un aumento estadísticamente significativo en los niveles de expresión de BCRP ?medidos por Western Blot- en aquellos cultivos que expresaron Xsal por 24 y 72h, así como en los que expresaron Xmut por 72h; y (ii) un aumento estadísticamente significativo en los niveles de la proteína MRP1 en las células Huh7 luego de 24h de expresión de Xmut. Conclusiones: Dichos hallazgos ameritan su análisis ex vivo para evaluar las potenciales nuevas implicancias ?al menos de bcrp y mrp1- en la hepatitis B crónica, la oncogénesis hepática y en el tratamiento del HCC.