Poloxámeros, poloxaminas y su rol para optimizar la farmacoterapia del carcinoma hepatocelular con doxorrubicina

CYNTHIA C CASTRONUOVO, ; MARÍA L CUESTAS, ; EMILIANO A GENTILE, ; NATALIA GÓMEZ, ; AMALIA CASTILLO, ; CECILIA DELFINO, ; CARLOS DAVIO, ; JOSÉ R OUBIÑA, ; ALEJANDRO SOSNIK, ; VERÓNICA L MATHET

Congreso; XVII Congreso Argentino de Hepatología.; 2013

Introducción. La capacidad de las células tumorales de adquirir resistencia a antineoplásicos está frecuentemente mediada por la sobreexpresión de proteínas de la superfamilia ABC (ATP-Binding Cassette), las cuales son bombas transmembrana activas implicadas en la extrusión de diversas drogas. BCRP es un miembro de la subfamilia ABCG cuya sobreexpresión está asociada a la resistencia a múltiples fármacos como el antitumoral doxorrubicina (DOXO). Una de las estrategias para mejorar la eficacia de la terapia antineoplásica es la formulación de fármacos donde el compuesto activo esté acompañado de copolímeros de poli(óxido de etileno) y poli(óxido de propileno) [PEO y PPO, respectivamente] como poloxaminas y poloxámeros. Existen reportes en la literatura internacional que demuestran su potencial rol como agentes que revierten la resistencia a múltiples drogas. Objetivo. Estudiar el efecto de diferentes copolímeros de PEO-PPO sobre los niveles de expresión de BCRP en dos líneas celulares de hepatoma humano. Materiales y Métodos. Las líneas celulares PLC/PRF/5 y SKHep1 se incubaron con las poloxaminas T904, T304 y T1107 y el poloxámero F127 a diversas concentraciones (1%; 0,1%; 0,01%). Al cabo de 24 y 72 h., se evaluó el efecto de dichos copolímeros sobre la expresión de BCRP por Western Blot y Real TimePCR. Asimismo, se analizó mediante citometría de flujo la capacidad de los mismos de inducir apoptosis y de afectar el potencial de membrana mitocondrial con el fin de ahondar en los posibles mecanismos de acción de dichos anfifilos sobre la inhibición en la expresión de BCRP. Finalmente, se estudió la capacidad de los mismos de revertir la resistencia al antitumoral DOXO calculando el índice de Reversión a la Resistencia (IRR) definido como el cociente entre la IC50 de DOXO y la IC50 de DOXO+copolímero. Los experimentos fueron analizados mediante ANOVA usando el post-test de Bonferroni. Los resultados se expresaron como la media ± desvío estándar (p < 0,05). Resultados. En ambas líneas celulares la mayoría de los copolímeros ensayados produjo un aumento en la acumulación intracelular de DOXO y una reducción en la expresión de BCRP. Dichos efectos fueron dependientes de la línea celular estudiada, el tiempo de exposición y la concentración de cada copolímero. También se observó que dichos copolímeros afectan el potencial de membrana mitocondrial y presentan efectos pro-apoptóticos, sugiriendo un posible rol sinérgico con el antitumoral DOXO. Conclusiones. Los copolímeros estudiados contribuyen a la quimiosensibilización de líneas celulares de estirpe hepatocitaria provenientes de hepatoma humano, mediante la disminución en la expresión de BCRP. Este efecto ppodría también deberse a una disminución de la síntesis del ATP necesario para la actividad funcional de dicha bomba, como consecuencia del efecto de los polímeros sobre el potencial de membrana mitocondrial. Estos hallazgos demuestran la potencial utilidad de estos copolímeros como agentes de reversión a la resistencia, aumentando de esta manera la eficacia de la quimioterapia contra el cáncer.