Alteración en la expresión de transportadores ABC como consecuencia de la replicación del virus de Hepatitis B: ¿un mecanismo alternativo de resistencia al tratamiento con antivirales?

AI CASTILLO, ; ML CUESTAS, ; CC CASTRONUOVO,; EA GENTILE, ; CM DELFINO, ; J OUBIÑA, ; VL MATHET

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología.; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

La eficacia de la terapéutica antitumoral es frecuentemente limitada por mecanismos celulares de resistencia que resultan en un aumento en el eflujo de las drogas utilizadas, reduciendo de esta manera los niveles de droga intracelular y causando resistencia a la misma. Esta capacidad de las células de adquirir resistencia a múltiples compuestos está mediada por la sobreexpresión de transportadores ABC (ATP-binding cassette transporters), los cuales son bombas transmembrana que transportan sus sustratos desde el interior de la célula hacia el medio extracelular utilizando la hidrólisis de ATP como fuente de energía. Se expresan  tanto en células tumorales como en diversos tejidos normales, entre ellos el hígado. Estas proteínas son capaces de transportar una amplia variedad de sustratos endógenos (nucleótidos cíclicos, hormonas esteroideas, ácidos biliares, glutatión, etc.) así como una diversa variedad de drogas, como agentes antitumorales, antivirales, antibióticos y agentes cardiovasculares, entre otros. Se ha reportado que el genoma del Virus de Hepatitis B (HBV) codifica para proteínas con capacidad transactivadora de genes virales y celulares, como lo son las proteínas regulatorias HBx y Pre-S2. Es por eso que el objetivo del presente trabajo consistió en medir alteraciones como consecuencia de la replicación del HBV en la expresión de algunos de los transportadores ABC involucrados en la resistencia a antivirales y/o antitumorales que se expresan normalmente en el hígado. Para ello se utilizó la línea celular HepG2.2.15, la cual es un modelo de replicación in vitro del HBV. Se midió el nivel de mRNA y proteína de los transportadores ABC MDR1, MRP1, BCRP y MRP4 en dichas células, mediante qPCR Y Western blot respectivamente, respecto de las células control (HepG2). Se documentó una disminución del mRNA de bcrp en las células con replicación activa del HBV (reducción del 97% respecto del control, p<0.01), así como un aumento del mRNA de mrp4 (aumento de 264% respecto del control, p<0.01). No se observaron alteraciones estadísticamente significativas de los mRNA de mdr1 y mrp1. A nivel de la expresión proteica (determinada mediante Western blot) se observa un correlato en la disminución encontrada en el mRNA de bcrp causada por la replicación del HBV. Estos resultados confirman la capacidad del HBV para alterar la expresión de algunos de los transportadores ABC estudiados, lo cual implicaría una alteración en la sensibilidad a distintas drogas en las células infectadas por dicho virus. Esto podría constituir un mecanismo adicional y novedoso por el cual HBV favorecería el desarrollo de resistencia a los fármacos antivirales que se utilizan actualmente en el tratamiento de la hepatitis B crónica, así como en la terapéutica antitumoral utilizada contra el hepatocarcinoma. Resta dilucidar el mecanismo por el cual la replicación del HBV afecta la expresión de los transportadores estudiados.