“Circulación del Virus de la Hepatitis D y variantes del L-HDAg en la Comunidad Mbyá-Guaraní de la Provincia de Misiones.”

DELFINO, CM; ; GENTILE, E; ; CASTILLO, A; ; EIRIN, ME; .; BERINI, C; ; MALAN, R; ; PEDROZO, W; ; KRUPP, R ;; BLEJER, J; ; SALAMONE, H; ; MATHET, VL; ; BIGLIONE, MM

Buenos Aires

Congreso; XIV Congreso Argentino de Hepatología.; 2011

Sociedad Argentina de Hepatologia

Introducción: El Virus Hepatitis D (VHD) fue descubierto en un grupo de pacientes italianos crónicamente infectados con el Virus Hepatitis B (VHB), en 1977. Es un virus que necesita del VHB para su propagación celular debido a que carece de un sistema de exportación. Dentro del virión de VHD se encuentra el ARN genómico asociado con múltiples copias del antígeno Delta (HDAg). Esta proteína presenta dos isoformas, S-HDAg y L-HDAg, con diferentes funciones cada una. El VHD entra al individuo por coinfección con VHB (aumenta el riesgo de tener hepatitis fulminante) o superinfección (incrementa en un 80% la incidencia de cirrosis y carcinoma hepatocelular). Se han descripto 8 genotipos en diferentes zonas geográficas. Solo el genotipo 1 presenta distribución mundial. Objetivo: Detectar la circulación de la infección por VHD en una comunidad Mbyá-guaraní de Misiones, y analizar la secuencia aminoácidica de la proteína L- HDAg. Detectar la circulación de la infección por VHD en una comunidad Mbyá-guaraní de Misiones, y analizar la secuencia aminoácidica de la proteína L- HDAg. : El Virus Hepatitis D (VHD) fue descubierto en un grupo de pacientes italianos crónicamente infectados con el Virus Hepatitis B (VHB), en 1977. Es un virus que necesita del VHB para su propagación celular debido a que carece de un sistema de exportación. Dentro del virión de VHD se encuentra el ARN genómico asociado con múltiples copias del antígeno Delta (HDAg). Esta proteína presenta dos isoformas, S-HDAg y L-HDAg, con diferentes funciones cada una. El VHD entra al individuo por coinfección con VHB (aumenta el riesgo de tener hepatitis fulminante) o superinfección (incrementa en un 80% la incidencia de cirrosis y carcinoma hepatocelular). Se han descripto 8 genotipos en diferentes zonas geográficas. Solo el genotipo 1 presenta distribución mundial. Objetivo: Detectar la circulación de la infección por VHD en una comunidad Mbyá-guaraní de Misiones, y analizar la secuencia aminoácidica de la proteína L- HDAg. Detectar la circulación de la infección por VHD en una comunidad Mbyá-guaraní de Misiones, y analizar la secuencia aminoácidica de la proteína L- HDAg. Materiales y Métodos: Se realizó el diagnóstico para la infección por VHD en 46 muestras reactivas para al menos un marcador serológico de VHB, en individuos de la comunidad Mbyá-guaraní ubicada al Norte de la provincia de Misiones. Todas las muestras fueron analizadas por ELISA (anti-HDV Abbott) y se realizó una amplificación genómica parcial por RT- Nested PCR del HDAg, previa extracción de ARN utilizando TRizol®. Los amplicones obtenidos se secuenciaron bidireccionalmente, se realizó el análisis filogenético y se estudiaron las secuencias aminoácidicas deducidas por Bioedit 7.1 entre la posición 196 y 214 específica de la isoforma L-HDAg que incluye la señal de exportación nuclear (197-210). Se realizó el diagnóstico para la infección por VHD en 46 muestras reactivas para al menos un marcador serológico de VHB, en individuos de la comunidad Mbyá-guaraní ubicada al Norte de la provincia de Misiones. Todas las muestras fueron analizadas por ELISA (anti-HDV Abbott) y se realizó una amplificación genómica parcial por RT- Nested PCR del HDAg, previa extracción de ARN utilizando TRizol®. Los amplicones obtenidos se secuenciaron bidireccionalmente, se realizó el análisis filogenético y se estudiaron las secuencias aminoácidicas deducidas por Bioedit 7.1 entre la posición 196 y 214 específica de la isoforma L-HDAg que incluye la señal de exportación nuclear (197-210). Resultados: En ninguna de las muestras séricas se detectó la presencia de anticuerpos anti-VHD por ELISA, mientras que en 3 se amplificó RNA de VHD. Las mismas se clasificaron como genotipo 1. Todas las secuencias aminoácidicas presentaron 6 variantes: W196I, D197 F, I198T, F200L, P201Q y A202R; además de la inserción de un aminoácido G entre las posiciones 196 y 197. En ninguna de las muestras séricas se detectó la presencia de anticuerpos anti-VHD por ELISA, mientras que en 3 se amplificó RNA de VHD. Las mismas se clasificaron como genotipo 1. Todas las secuencias aminoácidicas presentaron 6 variantes: W196I, D197 F, I198T, F200L, P201Q y A202R; además de la inserción de un aminoácido G entre las posiciones 196 y 197. Conclusión: Por primera vez se describe la circulación de VHD en la comunidad Mbyá-guaraní de Argentina. La detección de RNA de VHD en muestras no reactivas por ELISA demostraría la importancia de la utilización de métodos moleculares en el diagnóstico de esta infección. Por otro lado, los cambios aminoácidicos detectados de la isoforma L- HDAg en las posiciones estudiadas sustentan la importancia de realizar ensayos in vitro para evaluar su impacto en la patogenia de la infección por VHD. Por primera vez se describe la circulación de VHD en la comunidad Mbyá-guaraní de Argentina. La detección de RNA de VHD en muestras no reactivas por ELISA demostraría la importancia de la utilización de métodos moleculares en el diagnóstico de esta infección. Por otro lado, los cambios aminoácidicos detectados de la isoforma L- HDAg en las posiciones estudiadas sustentan la importancia de realizar ensayos in vitro para evaluar su impacto en la patogenia de la infección por VHD.