NUEVO CLUSTER DEL GENOTIPO “A” DEL VIRUS DE LA HEPATITIS B (HBV) ENTRE USUARIOS DE DROGAS INYECTABLES (UDIS) DE BUENOS AIRES

TRINKS, J.; CUESTAS, M. L; MATHET, V. L.; RIVERO, C.; MINASSIAN, M. L.; RUIZ, V.; ROSSI, D.; REY, J.; MARTÍNEZ PERALTA, L. A.; WEISSENBACHER, M. C.; KURBANOV, F.; TANAKA, Y.; MIZOKAMI, M.; OUBIÑA, J. R.

Vaquerias, Córdoba Argentina

Congreso; XXVI Reunión Científica Anual de SAV-2006; 2006

SAV, AAM

INTRODUCCIÓN: De acuerdo a una divergencia superior o igual al 8% en la secuencia nucleotídica completa, HBV ha sido clasificado en 8 genotipos (A – H) asociados a una predominante distribución geográfica. El genotipo A fue subdividido a partir de una diferencia intergrupo del 4% en los genomas completos, en 3 subgrupos denominados A1 (predominante en Asia, África y Brasil), A2 (circulante en Europa, Norteamérica y América Latina) y A3 (descripto en Camerún y Gabón).Varios reportes han descripto 9 tipos serológicos -denominados subtipos- del antígeno de superficie del HBV (HBsAg) y designados adw2, adw4, ayw1, ayw2, ayw3, ayw4, adrq+, adrq- y ayr. Existe una correlación entre genotipos y subtipos, aunque algunos de éstos pueden ser codificados por más de un genotipo. Dentro del genotipo A predomina el subtipo adw2, aunque se han reportado cepas en África y Filipinas con subtipo ayw1.El objetivo del presente estudio fue la caracterización genómica parcial de secuencias de HBV pertenecientes a UDIs de Buenos Aires.PACIENTES, MATERIALES Y MÉTODOS: En el período 2000-2001 se recolectaron, mediante el procedimiento denominado “snowball” (bola de nieve), 78 muestras séricas HBsAg y/o anticuerpo anti-core (AcHBc IgG) positivas pertenecientes a UDIs de Buenos Aires. Mediante PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) dirigida al gen S, se investigó la presencia de ADN del HBV. En las muestras PCR [+], el genotipo viral fue determinado por RFLP (Polimorfismo de la Longitud de los Fragmentos de Restricción) y en seis de ellas fue corroborado por secuenciación y subsiguiente análisis filogenético con los métodos Neighbor Joining y Maximum Likelihood utilizando el paquete PHYLIP versión 3.5 c. Las matrices de identidad se obtuvieron con el programa BioEdit. Con el objetivo de descartar que los resultados de genotipificación fueran producto de la técnica de muestreo por la cual la población en estudio se comporta como un grupo cerrado, se analizaron paralelamente 3 secuencias de HBV obtenidas de pacientes internados en una institución de la Prov. de Buenos Aires dedicada al cuidado de menores en el año 1993. RESULTADOS: Veinte muestras resultaron PCR [+]. Seis de ellas, adscriptas al genotipo A, fueron seleccionadas para posterior análisis. Los árboles filogenéticos realizados por los dos métodos demuestran, con un bootstrap superior al 70%, que las cepas de UDIs argentinos forman un cluster distinto al de los subgrupos A1, A2 y A3. Las muestras se encuentran íntimamente relacionadas con una identidad nucleotídica intragrupo de 99,1% ± 0,3 (desvío éstandar). A su vez, el porcentaje de identidad con los distintos subgrupos fue del 95,8% ± 0,7 con A1; 97,8% ± 0,5 con A2 y 96,1% ± 0,3 con A3.Por otra parte, todas pertenecen al subtipo ayw1 codificado por las posiciones aminoacídicas Arg122, Pro127, Phe134, Ala159 y Lys160.El análisis filogenético de las cepas control revela que éstas se adscriben al genotipo D subtipo D2. La identidad nucleotídica entre las 3 muestras arroja un esperado 99,5% ± 0,2 mientras fue de 99% ± 0,2 con respecto a la secuencia consenso del subtipo D2.   Conclusiones CONCLUSIONES: Estos resultados nos permiten suponer que si bien las muestras de UDIs estudiadas conforman un grupo cerrado, constituirían un cluster no descripto hasta el momento dentro del genotipo A. Para corroborar este hallazgo, se procederá al secuenciamiento de genomas completos. De acuerdo a nuestro conocimiento, éste es el primer estudio en documentar la circulación en el continente americano de cepas del genotipo A subtipo ayw1.