Caracterización del genoma completo de 2 aislamientos del genotipo E del HBV en Argentina

EGUIBAR N, ; PERAZZO P, ; GENTILE E, ; CASTILLO A, ; DELFINO C, ; MATHET V; ML CUESTAS,; OUBIÑA J

Congreso; XV Congreso de la Sociedad Argentina de Infectología; 2015

Sociedad Argentina de Infectología

En nuestro laboratorio, se documentó por 1ra. vez la circulación en Argentina de 2 cepas del HBV del genotipo E provenientes de 2 pacientes pediátricas hermanastras (M, inmunizada contra la hepatitis B al nacer, y K, sin inmunización específica previa), ambas cursando una hepatitis crónica y sin tratamiento antiviral. El objetivo de este trabajo fue analizar el genoma completo de dichos aislamientos mediante la secuenciación nucleotídica de amplicones obtenidos por PCR. Se observaron las 4 características genéticas comunes a todas las cepas del genotipo E actualmente depositadas en el GenBank: a) una deleción de 3 nucleótidos en la región 5´de del dominio pre-S1 de la proteína L HBsAg; b) el motivo LSWTVPLEW entre los residuos 3-11 de dicho dominio; c) el subtipo serológico ayw4; y d) la sustitución A3095G que genera la introducción adicional de un codón de iniciación de la traducción (M83) en el dominio pre-S1, dentro de la región (solapada) D del promotor de pre-S2. Entre los aislamientos del genotipo E, dicha región, se encuentra habitualmente flanqueada por una secuencia de Kozak 5´GGCATGC3´ que regula la eficiencia del inicio de la traducción, al contener G en la posición -3 y C en la posición +4. Sin embargo, se observó que los genomas de los aislamientos M y K poseen una G en la posición -3 pero una A en +4, lo cual podría afectar la traducción de la proteína M HBsAg. Ambas muestras (M y K) exhibieron dentro de la proteína L HBsAg las sustituciones Y195S y A264D, detectándose sólo en M la mutación Q177H. Se detectó la mutación R152I en el Core del aislamiento M. En la proteína X de los aislamientos M y K del HBV, se evidenció la sustitución W87R. Con respecto a la Polimerasa viral sólo se observó la sustitución rtY221F en ambas muestras, asociada a la resistencia al adefovir. En la proteína S del HBV se evidenciaron las sustituciones T57I, S59N, L209V y R215L (epítope para LTCD4+) en ambas muestras. En la muestra M se detectó mediante clonado molecular, la cocirculación de las variantes G145 y G145R (mutante de escape a los anticuerpos neutralizantes anti-HBs más frecuentemente documentada a nivel mundial) mientras que en K se observó la presencia de una población viral mixta con fenotipos D144 y D144A (otra mutante de escape). Dado que el genotipo E es el que presenta el determinante ?a? más divergente entre todos los descriptos, sería relevante estudiar la eficacia de las vacunas contra el HBV actualmente comercializadas (preparadas en occidente con HBsAg del genotipo A, subtipo adw) para proteger frente a la infección con genotipo E. Esta característica, junto a la emergencia de mutantes de escape S, ha promovido la reciente evaluación de dicha vacuna contra el HBV en países donde dicho genotipo prevalece. Por lo expuesto, la caracterización del genoma completo de los 2 aislamientos del genotipo E del HBV en Argentina tiene importantes implicancias en la patogénesis, la epidemiología y la profilaxis contra la hepatitis B.