Actividad de Extractos Orgánicos Obtenidos de Especies Puneñas de Fabiana sp. Frente a Microorganismos Resistentes a Antibióticos

CUELLO S.,; LIZARRAGA E.,; ISLA M.I.

Tafí del Valle. Tucumán. Argentina

Jornada; XXIV Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2007

Asociación de Biología de Tucumán

Introducción: En la cultura popular puneña se atribuyen a algunas especies de Fabiana Ruiz & Pav. (Solanaceae) propiedades medicinales (antisépticas, antitusivas, fracturas, moquillo, etc.). En trabajos previos se determinó que las tinturas de Fabiana bryoides Phil., Fabiana punensis S.C.Arroyo, Fabiana densa J. Rémy, especies que crecen en la región fitogeográfica de la puna del noroeste argentino presentan capacidad antibiótica frente a patógenos humanos antibiótico resistentes. Los valores de concentración inhibitoria mínima (CIM) oscilan entre 20 y 160 µg/ml con valores de Concentración bactericida mínima semejantes o hasta cuatro veces superiores a los valores de CIM. El objetivo de este trabajo fue realizar extracciones fraccionadas de partes aéreas de las tres especies de Fabiana en distintos sistemas de solventes y seleccionar aquellas de mayor capacidad antibiótica para realizar el aislamiento e identificación de los metabolitos activos. Materiales y métodos: El material vegetal (partes aéreas) fue colectado en Antofagasta de la Sierra, Pcia. de Catamarca en el mes de Marzo del 2007 y secado en estufa de aire forzado. Se realizaron extracciones de las tres especies de Fabiana en un equipo Soxhlet empleando solventes de polaridad creciente: hexano, cloroformo, acetato de etilo y metanol. Las diferentes fracciones de cada especie fueron evaporadas a sequedad y resuspendidas en metanol obteniendo una solución de concentración final de 10 mg/ml. La identificación de las fracciones con capacidad antibacteriana se realizó mediante un análisis bioautográfico en placas de silica gel F254 por dot blot (100 µg de cada una de las fracciones y 200 µg para  ATCC 35218) y sobre placas corridas cromatograficamente (150 µg de cada una de las fracciones). A cada placa se adicionaron 3 ml de medio de cultivo (infusión de cerebro corazón adicionada de 0,6% de agar) inoculado con 105 UFC de bacterias antibiótico resistentes aisladas de infecciones de piel y partes blandas: Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli; y la ATCC 35218 (E. coli). Las placas se incubaron por 24 horas en estufa a 35ºC y se observó la inhibición del crecimiento bacteriano mediante un revelado con 3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium, MTT.  Resultados: La actividad inhibitoria de las diferentes fracciones se resume a continuación: F.  bryoides F.  densa F.  punensis Microorg. 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 S. aureus +++ ++ + - + +++ ++ - ++ + ++ - E. faecalis +++ ++ + - + ++ ++ - + + ++ - P.aeruginosa - - + - - + + + - - ++ - E. coli - - + - - - - - - + ++ - ATCC 35218 +++ ++ +++ + +++ ++ - - - ++ +++ + Referencias: Fracciones: 1= hexano, 2=cloroformo, 3=acetato de etilo, 4=metanol, (+) inhibición, (-) no inhibición Conclusiones: Se observó que a la concentración ensayada las tres especies son mas activas frente a bacterias Gram­ (+) que sobre Gram (-). Las fracciones activas fueron obtenidas con hexano, cloroformo y acetato de etilo, siendo la ultima fracción la que presenta mayor espectro de acción principalmente en F.punensis. A partir de cada una de las fracciones activas se realizarán aislamientos bioguiados con el propósito de identificar los metabolitos antibióticos. Los resultados obtenidos hasta el presente justifican el uso tradicional de estas especies como antiséptico. Agradecimientos: ANPCyT, CONICET, CIUNT