INVESTIGADORES
ISLA Maria Ines
congresos y reuniones científicas
Título:
Potencial rol fisiológico de una proteína inhibidora de invertasa de frutos de Cyphomandra betacea Sendt.
Autor/es:
ORDOÑEZ R.M., VATTUONE, M.A., ISLA, M.I.
Lugar:
Santa Rosa. La Pampa
Reunión:
Congreso; XXV Reunión Argentina de Fisiología Vegetal.; 2004
Institución organizadora:
Socieda Argentina de Fisiología vegetal
Resumen:
En trabajos previos informamos la presencia en frutos maduros de Cyphomandra  betacea Sendt de una proteína inhibidora de la actividad de la invertasa ácida soluble (PII) in vitro (Ki de 3,3 mM )(Ordóñez et al., 2000). Esta proteína de 19 kDa se comporta como una fitohemoaglutinina, aglutina glóbulos rojos humanos sin especificidad de grupo sanguíneo, es interespecífica ya que es capaz de inhibir invertasas ácidas solubles aisladas de vegetales inferiores y supe-riores. Estudios de localización subcelular indicaron que la proteína está localizada en pared celular, mientras que la invertasa ácida soluble se encuentra en vacuola (Ordóñez et al. 2003). La diferente compartimentalización de la proteína con la enzima hace improbable que sea un regulador de la actividad de la invertasa ácida soluble in vivo. Estudios posteriores demostraron que esta proteína se comporta como un inhibidor de glicosidasas  producidas por bacterias patógenas vegetales y hongos xilofagos durante su invasión en los tejidos vegetales. Estos resultados nos llevaron a pensar en su probable participación en los mecanismos de defensa de las plantas (Isla et al., 2001). Con el propósito de caracterizar este péptido y evaluar su potencial rol fisiológico analizamos su efecto sobre el crecimiento de bacterias y hongos patógenos vegetales y  sobre hongos xilófagos, la capacidad  depuradora de radicales libres en sistemas no lipídicos, la capacidad para inhibir la formación de peróxidos de lípidos y sustancias reactivas al ácido tiobarbiturico y la citotoxicidad.  Se evaluó el efecto de esta proteína sobre el crecimiento de bacterias (Xanthomonas campestris pvar vesicatoria CECT 792, Burkholderia solanacearum CECT 125, Pseudomonas corrugata CECT 124, Pseu-domonas syringae y Erwinia carotovora var carotovora) y hongos (Ganoderma applanatum, Pycnosporus sanguineous, Aspergillus niger, Fusarium sp, Penicillium notatum) mediante ensayos de difusión en agar. Se determinaron los valores de concentración inhibitoria mínima (CIM) y concentración fungicida mínima (CFM) mediante técnicas de macrodilución en agar y microdilución en medio líquido (NCCLS 2002). Se obtuvieron valores de CIM  entre 60-100 µg/ml, mientras que los valores de CFM fueron 2 a 4 veces superiores a los valores de CIM. El test de viabilidad celular realizado con Artemia salina reveló que la proteína aislada de frutos maduros de C. betacea tiene un débil efecto citotóxico (DL50=        450 ppm). Esta proteína si bien no fue capaz de proteger a los lípidos de la oxidación hasta concentraciones de 100 µg/ml en nuestras condiciones de trabajo,  presenta capacidad depuradora de radicales libres, con valores CD50 (capacidad depuradora 50%) de  19,3µg/ml. De acuerdo a nuestros resultados podemos concluir que la PII se comportaría como un péptido de defensa de la planta inhibiendo el crecimiento de microorganismos patógenos vegetales, inhibiendo la actividad de enzimas hidrolíticas liberadas por los patógenos y/o  depurando radicales libres. Bibliografía - Ordoñez R.M., Vattuone M., Isla M.I. 2000. J. Enz. Inh. 15, 583-596. - Isla M.I., Ordoñez R.M., Nieva Moreno M.I., Vattuone M. 2001. J. Enz. Inh. 16, 517-525. - Ordoñez R.M., Vattuone M., Isla M.I. 2003. J. Exp. Bot. Enviado a publicar. -NCCLS, 2002; National Committee for Clinical Laboratory Standards.