INVESTIGADORES
GEFFNER Jorge Raul
congresos y reuniones científicas
Título:
CÉLULAS ESTROMALES MESENQUIMALES DE MÉDULA ÓSEA INCREMENTAN LA PRODUCCIÓN DE IL-12 INDUCIDA POR LPS EN MACRÓFAGOS COLECTADOS DE PERITONEO INFLAMADO
Autor/es:
J MAGGINI, C CAÑONES, S RAIDEN, M VERMEULEN, I PIAZON, I NEPOMNASCHY, J GEFFNER
Lugar:
MAR DEL PLATA
Reunión:
Congreso; CONGRESO ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INMUNOLOGIA; 2007
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE INMUNOLOGIA
Resumen:
(0851) CÉLULAS ESTROMALES MESENQUIMALES DE MÉDULA ÓSEA INCREMENTAN LA PRODUCCIÓN DE IL-12 INDUCIDA POR LPS EN MACRÓFAGOS COLECTADOS DE PERITONEO INFLAMADO J Maggini, C Cañones, S Raiden, M Vermeulen, I Piazon, I Nepomnaschy, J Geffner IIHEMA, Academia Nacional de Medicina   Evaluamos la influencia de células mesenquimales estromales de médula ósea (CM) sobre la actividad proinflamatoria de macrófagos. Las CM fueron obtenidas a partir de médula ósea de ratones C57BL/6J adultos, de acuerdo a protocolos convencionales Las células totales de médula ósea fueron cultivadas por 48 hs, descartándose la fracción no adherente. Se cultivaron por 24 días adicionales, repicándose posteriormente, empleando finalmente células correspondientes a los pasajes 5 a 9. Las células obtenidas mostraron ser negativas para marcadores de linaje hematopoyético y endotelial (CD3,CD14,CD16,CD19,CD56,CD45 y CD31) y positivas para SCA-1. Los macrófagos peritoneales (Mac) se obtuvieron a partir de ratones C57Bl/6J, luego del tratamiento por vía i.p. con tioglicolato por 96 hs (pureza > 80%). En placas de 24 pozos, fondo plano, se establecieron monocapas de CM, añadiéndose 350000 Mac. Luego de 24 hs de cocultivo se observó una densidad similar de Mac en los cultivos realizados en ausencia o presencia de CM. Los cultivos fueron estimulados por 24 hs con LPS (30 ng/ml) evaluándose: a) producción de IL-12 en los sobrenadantes y b) fenotipo de los Mac por citometría de flujo. Encontramos que las CM indujeron un notorio incremento en la producción de IL-12 por Mac estimulados por LPS: concentración de IL-12 en los sobrenadantes (ng/ml)= 0.27±0.1, 0.25±0.1, 1.0±0.3 y 6.9±2.2, para Mac, Mac + CM, Mac + LPS y Mac + CM + LPS, respectivamente. Observamos, por otra parte, un marcado incremento en la expresión de CD86 en Mac coincubados con CM (% incremento en la intensidad media de fluorescencia para CD86: 62 ± 26% (Mac coincubados con CM vs Mac solos) y 281 ± 55% (Mac coincubados con CM en presencia de LPS vs Mac incubados sólo con LPS). Contrastando con el usual perfil inmunosupresor mediado por CM descrito en la literatura, nuestros resultados sugieren que las CM son capaces de potenciar la actividad proinflamatoria de macrófagos activados.