Caracterización molecular de un nuevo co-factor de micro ARNs en plantas

MANAVELLA, PABLO A; TOMASSI, ARIEL H

Workshop; Workshop Biología Celular y Molecular del ARN; 2018

La regulación post-transcripcional de la expresión génica mediada por micro ARNs (miARNs) controla numerosos procesos importantes en el desarrollo y la adaptación de las plantas al ambiente. Si bien en los últimos años se han identificado varios factores partícipes de los procesos de biogénesis y acción de los miARNs, muchos mecanismos regulatorios involucrados se mantienen aún poco claros. En nuestro laboratorio se realizó un screening genético para la identificación de nuevos componentes de la maquinaria de biogénesis y acción de los miARNs. Mediante la mutagénesis por EMS de plantas transformadas con un sistema reportero basado en la actividad Luciferasa y su silenciamiento por un miARN artificial, se han aislado alrededor de 30 mutantes deficientes en miARNs. A partir de este screening, se han descripto nuevos cofactores de esta vía. Entre las mutantes aún no caracterizadas, la mutante M141 presenta un fenotipo de desarrollo notoriamente afectado, elevados niveles de actividad Luciferasa, niveles de miARNs alterados, como así también en sus genes blancos. Por secuenciación de genoma completo seguido de SHORE mapping se identificaron 4 genes con mutaciones puntuales candidatos a ser responsables del fenotipo descripto. Uno de ellos, que codifica para una proteína desconocida aún no descripta, ha sido capaz de revertir este fenotipo. Además, ensayos de localización subcelular, colocalización subcelular y de interacción con factores conocidos de la biogénesis de miARNs lo postulan como un posible co-factor de esta vía, aunque su función específica aún se mantiene desconocida.