Caracterización de factores de transcripción de la familia WRKY de Helianthus annuus

GIACOMELLI, JORGE I., DEZAR, CARLOS A., CHAN RAQUEL L.

Rosario

Congreso; XXVII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2008

Caracterización de factores de transcripción de la familia WRKY de Helianthus annuus Giacomelli, Jorge I., Dezar, Carlos A., Chan Raquel L. Laboratorio de Biotecnología Vegetal, Fac. de Bioq. Y Cs. Biol. (UNL) CC 242 Paraje El Pozo, 3000 Santa Fe. E-mail: giacomelli@fbcb.unl.edu.ar En especies como Arabidopsis se han identificado más de 70 genes que codifican factores de transcripción (FTs) de la familia WRKY. Los estudios funcionales sobre estas proteínas indicaron que serían reguladores de la respuesta de defensa de las plantas frente al ataque de organismos patógenos. Algunos trabajos recientes presentaron evidencias que relacionan a estos FTs también con la respuesta a estrés abiótico. En ambos casos el conocimiento es escaso y en particular en girasol, no existe ningún tipo de informe sobre estos genes. El objetivo que nos propusimos en este trabajo fue el de caracterizar estructural y funcionalmente genes de esta familia en el cultivo de girasol. Identificamos cinco secuencias expresadas (ESTs) que correspondían a TFs de tipo WRKY y encaramos el aislamiento de los genes completos a partir de una biblioteca así como estudios de expresión de cada uno de ellos, como la primera etapa de su caracterización funcional. La metodología de RT-PCR cuantitativa nos permitió determinar que la expresión de HAWRKY2 aumenta cuando las plantas son tratadas con SA, IAA, manitol, BAP, daño mecánico o ataque de insectos. En el mismo sentido HAWRKY6 se induce por SA y se reprime por JA mientras que HAWRKY3 se reprime fuertemente en presencia de H202, NaCl, sacarosa o ABA y por deshidratación o por ataque de orugas (R. nu), y antagónicamente HAWRKY5 se induce en las mismas condiciones. No logramos detectar transcriptos de HAWRKY4 en ninguna de las condiciones ensayadas. Determinamos las secuencias de los genes HAWRKY4, HAWRKY5 y HAWRKY6 e hicimos un análisis informático de las mismas. El conjunto de resultados obtenidos hasta el momento nos permite inferir que los genes WRKY identificados en girasol participarían de respuestas a condiciones adversas de origen biótico y abiótico. Nos planteamos realizar a partir de los conocimientos adquiridos, estudios complementarios que nos permitan establecer las vías de señalización en las que participan estos genes y la función que estarían cumpliendo.