IAL   21557
INSTITUTO DE AGROBIOTECNOLOGIA DEL LITORAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Producción de baculovirus a baja multiplicidad de infección en cultivos en suspensión libres de suero de la línea celular saUFL-AG-286
Autor/es:
EBERHARDT I.; AMABLE G.; GIORIA V.; MICHELOUD G.; CLAUS J. D.
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Simposio; V Simposio Latinoamericano de Tecnología de Cultivos Celulares; 2012
Resumen:
Los baculovirus son
patógenos específicos de invertebrados, que se replican a través de un ciclo
bifásico que da origen a dos progenies virales estructuralmente diferentes, los
viriones brotados (BVs) y los viriones ocluidos en cuerpos de oclusión (OVs). Los
BVs de baculovirus son utilizados como inóculo para infectar cultivos de
células de insecto, y por tanto constituyen uno de los insumos de mayor impacto
sobre la economía de los procesos que hacen uso del sistema baculovirus-células
de insecto para la expresión de proteínas recombinantes, extensamente
utilizadas como inmunógenos vacunales. La optimización de la producción de BVs
de baculovirus presenta entonces un considerable interés industrial. A pesar de
este interés, se conoce muy poco sobre la influencia de los parámetros de
infección sobre la producción de BVs, y el potencial impacto de su manipulación
sobre los rendimientos virales. El
objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de la multiplicidad de infección
(MOI) y la densidad celular inicial (DCI) en la producción de BVs de
baculovirus, utilizando como modelo la infección de cultivos en suspensión de
la línea celular saUFL-AG-286 con el Virus
de la poliedrosis nuclear múltiple de Anticarsia gemmatalis (AgMNPV), en un
medio libre de suero, mediante un diseño factorial completo 22 y en
condiciones de infección asincrónica. Los resultados obtenidos mostraron que
tanto el rendimiento volumétrico (título viral) como la producción específica
de BVs por célula no fueron afectados por la MOI, pero se redujeron
significativamente con el incremento de la DCI. Por otro lado, el factor de
amplificación resultó afectado por la variación de ambos factores. Por tanto,
la producción de BVs de baculovirus en cultivos de células de insectos es
sensible a los cambios en los parámetros de infección, y la selección de una
combinación adecuada de valores de MOI y DCI permite mejorar los rendimientos
virales, alcanzando títulos superiores a 109 DICC50.ml-1.