TRANSFORMACIÓN GENÉTICA DE CAÑA DE AZÚCAR: OBTENCIÓN DE GENOTIPOS TOLERANTES A HERBICIDAS EN LA ESTACIÓN EXPERIMENTAL AGROINDUSTRIAL OBISPO COLOMBRES (EEAOC).

NOGUERA, A.S.; RACEDO, J.;FILIPPONE, M.P.;GARCÍA, M.B. Y CASTAGNARO, A. P.

Ciudad de Rosario, Santa Fe.

Congreso; RedBio 2009; 2009

La Sección Biotecnología de la EEAOC trabaja en transformación genética de caña de azúcar con el propósito de introducir genes de interés agronómico en variedades locales como RA 87-3. Se utiliza la técnica de biobalística que emplea micropartículas de tungsteno recubiertas con ADN, aceleradas con gas comprimido e introducidas en el explanto (callo). En este trabajo se presenta el procedimiento de transformación con un segmento lineal de ADN portador del gen EPSPS (otorga tolerancia al herbicida glifosato) y el gen de selección NPTII que proporciona resistencia a geneticina. Mediante ensayos previos se determinó que la concentración óptima del agente selectivo es de 45 mg/L. Se seleccionaron y regeneraron 107 eventos de transformación, en los cuales se confirmó la presencia del gen EPSPS mediante PCR. Las líneas transgénicas fueron aclimatadas en invernadero, de las cuales 50 se evaluaron fenotípicamente mediante la aplicación del herbicida al 0.1%, 1% (dosis comercial) y 10%. En base al comportamiento a la dosis comercial, se clasificaron 26 líneas tolerantes (T), 7 de tolerancia intermedia (TI) y 17 susceptibles (S). Inclusive, se detectaron dos líneas que toleraron una concentración del 10% de glifosato. Posteriormente, se seleccionaron tres líneas de cada una de las categorías (T, TI y S) y se analizó la disminución del peso fresco en comparación con los controles, 60 días posteriores a la aplicación del herbicida. Mientras en las líneas T la disminución no fue significativa, en las líneas TI y S se observó entre un 60% y 80% de disminución.