Desarrollo de una metodología simple y económica para cuantificar Diclazuril en tejido animal por HPLC-DAD

FEDERICO AZCÁRATE,; CARLOS EUGENIO BOSCHETTI

Santa Fe

Congreso; VI Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

Diclazuril (DZL) es un anticoccidiano que se adiciona en alimentos balanceados con el fin de prevenir y tratar la coccidiosis, enfermedad amoébica que afecta a los animales de corral. Debido a tal aplicación los organismos reguladores han establecido niveles de referencia para DZL; en Argentina, SENASA indica un límite máximo permitido de residuo de 1,5 y 0,5 ug/g para hígado y músculo respectivamente. Varios métodos publicados se aplican a la determinación de DZL en alimentos balanceados, en el rango de 0,1 a 1,5 mg/Kg [1,2]. Unos pocos métodos describen la determinación de DZL en tejido animal, y requieren el uso de LC-MS/MS. En este trabajo se presenta un método simple para la determinación de DZL en tejido aviar, capaz de llegar a un LOQ menor al requerido por SENASA como  máximo permitido de residuo, y en el que se evita el empleo de LC-MS.Análisis de las muestras: Sobre el tejido previamente picado se realizó un paso de extracción, una etapa de limpieza de restos lipídicos, y la cuantificación del extracto en un cromatógrafo líquido de alta eficiencia Agilent 1100 con detección de arreglo de diodos a 276 nm. Para la separación se utilizó una columna C18 de 150 mm x 4.6 mm x 5 um y se empleó una fase móvil acetonitrilo-agua 1-1.Resultados: Se realizó un estudio de linealidad de patrones analizando cinco diluciones de DZL en el rango de 0,26 a 2,04 ug /mL por triplicado, obteniéndose un valor de r2 mayor a 0,995. Para validar la técnica se trabajó con cinco muestras fortificadas en el rango de 51 a 408 ug/Kg analizándose cada nivel por triplicado. El experimento se repitió a los quince días por otro técnico para evaluar las variables tiempo y analista. La recuperación promedio fue de 74,6% con un desvío estándar de 5,9 y un coeficiente de variación porcentual de 7,9. Los límites de cuantificación y de detección alcanzados fueron de 52,2 y de 17,4 ug/Kg respectivamente. Se realizó un estudio de robustez siguiendo el procedimiento de Yoden y Steiner para establecer los puntos determinantes del procedimiento.Conclusiones: Se desarrollo una metodología simple, económica y robusta para cuantificar DZL en tejido animal, que cumple con todas las especificaciones establecidas por SENASA y permite cuantificar el compuesto en niveles inferiores a los requeridos por las regulaciones.