INVESTIGADORES
BOLONTRADE Marcela Fabiana
informe técnico
Título:
Informe Técnico de Avance 2 _Rol de Células Madre Adultas Mesenquimales Durante la Formación del Estroma Tumoral y su uso como Vehículo de Transporte de Genes Terapéuticos
Autor/es:
MARCELA F. BOLONTRADE, OSVALDO PODHAJCER
Fecha inicio/fin:
2008-04-15/2009-04-15
Páginas:
1-11
Naturaleza de la

Producción Tecnológica:
Informe Técnico de Avance de Instrumento de Agencia PICT
Campo de Aplicación:
Prom.Gral.del Conoc.-Cs.Medicas
Descripción:
Como uno de los principales logros del proyecto se ha conseguido identificar, mediante un esquema de aislamiento de células madre mesenquimales (MSCs) modificado a partir del protocolo universal, subpoblaciones que difieren en su comportamiento migratorio quimiotáctico y de adhesividad tanto a componentes de matriz extracelular como a monocapas de microendotelio. De este modo, la subpoblación MO tiene una respuesta migratoria mayor que la subpoblación MO/SN y presenta mayor adhesividad hacia fibronectina y hacia monocapas de microendotelio. A su vez, hemos demostrado que ambas subpoblaciones (MO y MO/SN) son multipotenciales, es decir que son capaces de diferenciarse hacia los 3 linajes que definen a las células madre mesenquimales, esto es linaje óseo, adipogénico y condrogénico. El conjunto de marcadores de superficie que definen a la población MSCs es positivo para ambas subpoblaciones (tales como CD90, CD73, CD105, CD44, CD166) mientras que los marcadores hematopoyéticos CD34 y CD45 son negativos en las subpoblaciones, así como tambien las moléculas coestimulatorias CD80 y CD86, y los antígenos de histocompatibilidad HLAI y II.  Sin embargo, las subpoblaciones identificadas por un compotamiento migratorio y adehrente diferencial, poseen un patrón de expresión que difiere en la expresión de intregrinas tales como CD49 a y b y CD51. La identificación de subpoblaciones dentro de la heterogenea población de MSCs permitrá una mayor ductilidad y eficiencia a la hora de elegir una subpoblación que deba poseer mayor eficiencia migratoria hacia un tumor. El hecho de identificar las subpoblaciones primero por un patrón de comportamiento y luego por medio de un panel de  expresión de moléculas funcionales de superficie pemite mayor precisiónen el momento de definir una subpoblación (panel de marcadores funcionales).   Otro logro del proyecto es la continuación y afianciamiento del banco experimental de MSCs de médula ósea (MO) humana, constituído con muestras provenientes del Hospital Naval Pedro Mallo (convenio de investigación). De este modo obtenemos muestras de (MO) de donantes normales para transplante de MO (consentimiento informado) y procedemos al aislamiento de las subpoblaciones de MSCs y almacenaje en nitrógeno líquido de subpoblaciones en pasajes 1 hasta 7. Este banco de MSCs es el que nos ha permitido avanxar con experimentos reproducibles tanto in vitro como in vivo a partir de una provisión no contínua de MO. Otro  logro en el proyecto a sido la puesta a punto de un sistema para obtener medios condicionados provenientes de  tumores frescos humanos, lo cual nos permitirá la identificacion de factores quimiotacticos que medien el reclutamiento de MSCs a partir de muestras representativas de tumores humanos. En este aspecto estamos avanzando actualmente.