Celulas perivasculares del cordon umbilical: una nueva fuente de células mesenquimales estromales como posible vehiculo de genes antitumorales contra el hepatocarcinoma.

BAYO FINA, J; FIORE, E; LLOYD, RODRIGO; BOLONTRADE, MARCELA F. ; SGANGA, LEONARDO; MALVICINI, MARIANA; RIZZO, MANGLIO M.; MARRODAN, MARIANO ; ALANIZ, LAURA; ATORRASAGASTI, CATALINA; PEIXOTO, E.; ANDREANI, O.; SILVA, M. ; AQUINO, JORGE B.; PODHAJCER, OSVALDO; GARCIA, MARIANA G.; MAZZOLINI GUILLERMO

Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Argentino de Hepatología; 2013

El tratamiento del hepatocarcinoma (HCC) avanzado sigue siendo un desafío. Más aún si se considera que su incidencia y mortalidad están en ascenso. En este contexto la terapia celular y génica emergen como alternativas promisorias. La capacidad de las células mesenquimalesestromales (MSC) de migrar hacia los tumores ha permitido utilizarlas como vehículoscelularesen diversos modelos experimentales de HCC. Si bien en la mayoría de los reportes utilizanMSC obtenidas de medula ósea (MO), recientemente se han aislado MSC a partir de fuentes neonatales como del cordón umbilical que son obtenidas sin necesidad de realizar procedimientos invasivos y no presentan consideraciones éticas. Los objetivos de este trabajo son establecer y caracterizar cultivos de MSC a partir de la fracción perivascular del cordón umbilical (HUCPV) y comparar la capacidad migratoriade las mismas hacia el HCC con respecto a las MSC-MO. Los cultivos obtenidos presentaron los marcadores fenotípicos característicos de estas células. Los ensayos de migración in vitro en cámaras de Boyden demostraron que las HUCPV presentaron una mayor capacidad de migrar, en comparación con las MSC-MO, hacia medios condicionados (MC) derivados tanto de líneas celulares de HCC humano (HuH7 y PLC/PRF/5), como hacia los obtenidos de líneas celulares de otros componentes del estroma tumoral como son las células estrelladas hepáticas (LX-2), fibroblastos (WI-38) y células endoteliales (HMEC-1) (p<0.05; Kruskal-Wallis). De similar manera también presentaron una mayor capacidad migratoria hacia MC obtenidos a partir de tumores exvivo los cuales fueron generados en ratones nudeBALB/c mediante la inoculación subcutánea (s.c.) de la línea HuH7 o un cultivo primario de HCC (HC-PT-5) (p<0.05; Kruskal- Wallis). Para evaluar la migración in vivo, se establecieron tumores s.c. de HuH7 en ratones nude BALB/c. Una vez establecido el tumor se administraron las MSC-MO o las HUCPV marcadas con el colorante DiR por vía intravenosa. El volumen tumoral fue evaluado hasta el día 7, momento del sacrificio, no encontrándose diferencia entre los animales que habían sido inoculados ya sea conMSCMO, HUCPV o solución fisiológica como control. Finalmente al momento del sacrificio los órganos (hígado, bazo, pulmón y tumor) de los animales fueron aislados y expuestos al bioluminómetro a fin de cuantificar la señal del colorante DiR. Ambas fuentes de MSC fueron localizadas preferentemente en el hígado, mientras que la señal en tumor, hígado y bazo fue menor (ANOVA p>0.001). Por otra parte, las HUCPV presentaron una mayor capacidad de migrar in vivo hacia el HCC en comparación con las MSC-MO así como una menor capacidad de migrar hacia el bazo (t-testp<0.01). Nuestros resultados indican que las HUCPV presentan una mayor capacidad de migrar hacia los factores producidos por el HCC en comparación con las MSC-MO, lo cual las convierte en una excelente alternativa como vehículo de genes antitumorales para el HCC.