Aplicacion de celulas estromales multipotentes de medula osea en un modelo murino de fibrosis hepatica

AQUINO, JORGE B.; FIORE, ESTEBAN; MALVICINI, MARIANA; MAGGINI, JULIAN; BAYO, JUAN; PICCIONI, FLAVIA; GARCIA, MARIANA G.; BOLONTRADE, MARCELA F.; LOPEZ, MARIA V.; ATORRASAGASTI, CATALINA; ALANIZ, LAURA; GEFFNER, JORGE; PODHAJCER, OSVALDO; MAZZOLINI, GUILLERMO

Buenos Aires

Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatologia; 2011

Asociacion Argentina para el Estudio de las Enfermedades del Higado

INTRODUCCIÓN: La cirrosis es la primera causa de trasplante hepático en la Argentina y, a excepción de este procedimiento, no existe en la actualidad un tratamiento eficaz para esta enfermedad. Las células estromales multipotentes (MSCs) tienen un especial interés por su potencial utilización en estrategias de terapia celular para el tratamiento de la fibrosis/cirrosis hepática. Estas células tienen la capacidad de migrar hacia los sitios de lesión y podrían ejercer efectos anti-fibrogénicos. OBJETIVOS: Evaluar la capacidad migratoria, la biodistribución in vivo y el efecto terapéutico de las MSCs en un modelo de cirrosis experimental en ratón. MATERIALES Y MÉTODOS: Para generar el modelo de fibrosis hepática avanzada, se aplicó tioacetamida (TAA) en ratones C57Bl/6 (por vía intraperitoneal, 3 veces/semana, en dosis de 200mg/kg, durante 12 semanas). Las MSCs se obtuvieron  de médula ósea de ratones singénicos y de ratones transgénicos para la proteína verde GFP y fueron caracterizadas por citometría de flujo y tests de diferenciación hacia osteoblastos, adipoblastos y condroblastos. Antes de su administración intravenosa, las MSCs  fueron marcadas con los colorantes CM-DiI, DiR, Hoechst o transducidas con un retrovirus codificante para el gen reportero venus para su visualización in vivo. Tras 7 o 14 días, los animales fueron sacrificados para su estudio. Se analizó la biodistribución in vivo de las células inyectadas de manera no invasiva, mediante bioluminómetro, y se determinó el grado de fibrosis hepática desarrollado mediante tinción con rojo sirio. RESULTADOS: Las cultivos obtenidos presentaron las propiedades características de MSCs. Mediante la utilización de bioluminómetro, a los 3 días post-transplante pudo detectarse una mayor presencia de MSCs en el hígado en comparación con otros órganos/tejidos a las distintas sobrevidas analizadas (2 horas, y 1 y 7 días). A los 7 días, las MSCs pudieron ser visualizadas por microcopia de fluorescencia. Sin embargo, a los 14 días no se encontró un número significativo de MSCs (marcadas previamente con CM-DiI, Hoechst, o transducidas con el retrovirus reportero) en el tejido hepático. Además, se observó un menor grado de fibrosis en los animales que recibieron MSCs en comparación con los tratados con vehículo (p<0,05; t-student; a 14 días post-trasplante). CONCLUSIONES: Las evidencias obtenidas sugieren que las MSCs podrían ejercer un efecto anti-fibrogénico en el modelo de fibrosis hepática estudiado. Asimismo, la presencia significativa de MSCs en el parénquima hepático permite considerar la posibilidad de utilizar estas células como vehículo de genes terapéuticos en el hígado.