INVESTIGADORES
BOLONTRADE Marcela Fabiana
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de la capacidad migratoria de las celulas mesenquimales estromales al hepato carcinoma
Autor/es:
BAYO, JUAN; BOLONTRADE, MARCELA F.; SGANGA, LEONARDO; MALVICINI, MARIANA; ALANIZ, LAURA; AQUINO, JORGE B.; FIORE, ESTEBAN; RIZZO, MANGLIO M.; RODRIGUEZ, ANDRÉS; LORENTI, ALICIA; ANDRIANI, OSCAR; PODHAJCER, OSVALDO; GARCIA, MARIANA; MAZZOLINI, GUILLERMO
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatologia; 2011
Institución organizadora:
Asociacion Argentina para el estudio de las enfermedades del higado
Resumen:
El hepatocarcinoma (HCC) es el 6º tumor sólido más frecuente y la tercera causa de muerte asociada a cáncer en el mundo. El HCC se desarrolla en la mayoría de los casos en pacientes con cirrosis hepática. El establecimiento y diseminación de un tumor depende no sólo del comportamiento de las células tumorales sino también del aporte del microambiente tumoral, donde además de la presencia de distintos tipos celulares como fibroblastos y macrófagos, intervienen factores pro-inflamatorios y quimiocinas. Estas quimiocinas son esenciales en el reclutamiento de las células mesenquimales estromales (MSC) capaces de migrar hacia sitios de injuria o remodelamiento tisular. El objetivo de este trabajo es estudiar la capacidad migratoria in vitro e in vivo de las MSC humanas provenientes de medula ósea (hMSC) de donantes sanos hacia el HCC. Ensayos de migración in vitro en cámaras de Boyden demostraron que las hMSC presentaron una elevada capacidad de migrar hacia medios condicionados (MC) derivados de líneas celulares de HCC humano (Hep3B, HuH7 y PLC/PRF/5), de cultivo primario de muestra de paciente (HC-PT-5) y de células estrelladas hepáticas humanas (línea LX-2), pero no presentaron migración hacia MC provenientes de fibroblastos (WI-38), células endoteliales (HMEC-1) o tejido no tumoral de muestra de paciente (AT-PT-5) (p<0.01; Kruskal-Wallis). Además, los MC de las células cultivadas en monocapa indujeron mayor migración de las hMSC que los MC obtenidos de cultivos en esferoides o de tumores ex vivo (p<0.05, Kruskal-Wallis). Los MC de las líneas de HCC y LX-2 incrementaron la adhesión de las hMSC a fibronectina, colágeno y células endoteliales, además de inducir la invasión a través de estos sustratos y aumentar la actividad de la metaloproteinasa 2. Para evaluar la migración in vivo, se inocularon de manera subcutánea o intrahepática con o sin cirrosis subyacente ratones nude BALB/c con HuH7. Con el tumor establecido se administraron las hMSC marcadas con los colorantes CMDil y DiR por vía intravenosa y se monitorizó la biodistribución en un bioluminómetro y la presencia de hMSC en los tejidos por microscopía de fluorescencia luego de sacrificar a los ratones al día 7. Las hMSC se localizaron en pulmón a 1 h y a las 24 h fueron observadas también en hígado y bazo. A los 7 días se localizaron en los órganos descriptos y en los tumores en el modelo tumoral subcutáneo. Sin embargo los MC derivados de hígado, bazo o pulmón de ratones portadores de tumor no indujeron la migración in vitro de las hMSC. Sorprendentemente, en el modelo ortotópico, las hMSC fueron localizadas preferentemente en el hígado a los 7 días. Nuestros resultados indican que factores producidos por el HCC y las células estrelladas hepáticas inducen la migración in vitro e in vivo de las hMSC. El estudio de estos mecanismos permitirá mejorar el reclutamiento de las hMSC hacia el tumor a fin de utilizarlas como vehículos celulares de agentes terapéuticos en el HCC.