Mecanismo de acción de un péptido quimérico del Interferón-alfa2b

BLANK VIVIANA C; PEÑA CLARA; ROGUIN LEONOR P

Mar del Plata. Argentina

Congreso; L Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos el efecto antiproliferativo de un péptido quimérico del interferón-a2b (IFN-a2b) que simula el dominio de la citoquina que se une a sus receptores. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la cascada de señales intracelulares activadas por este derivado sintético y la posible relación entre la inhibición del crecimiento celular y la inducción de apoptosis. Puesto que en la vía clásica de transducción de señales activadas por el IFN-a2b participan tirosina quinasas Janus y factores de transcripción STAT, evaluamos la estimulación de la proteina kinasa Jak1 y de los factores de transcripción STAT1 y STAT3 por ensayos de inmunoprecipitación y Western-blot. Luego de incubar células WISH durante 6 minutos en presencia de IFN-a2b o del péptido, se observó un aumento significativo de la fosforilación de Jak 1 (4% control, 45% IFN-a2b, 9% péptido), mientras que después de 20 minutos de incubación se obtuvo un incremento en la proporción de STAT3 fosforilada (0% control, 121% IFN-a2b, 30% péptido). La proteína STAT1 se fosforiló cuando las células se estimularon 20 minutos con IFN-a2b, pero no con el péptido, sugiriendo la existencia de un mecanismo de activación diferencial. Por ensayos de citometría de flujo demostramos que, después de 72 horas de incubación en presencia de IFN-a2b o del péptido, se obtuvo un incremento del porcentaje de células hipodiploides (13% control, 53% IFN-a2b, 45% péptido). Además, cuando se evaluaron a las 48 horas los niveles de expresión de fosfatidilserina en la membrana plasmática, observamos un aumento en el porcentaje de células en apoptosis temprana (20% control, 29% IFN-a2b, 34% péptido). Los resultados obtenidos indicaron que el péptido quimérico se comporta como un agonista parcial del IFN-a2b, activando al menos una de las vías de señalización inducidas por la citoquina. Asimismo, el efecto antimitogénico desencadenado por este derivado se encuentra estrechamente relacionado con la inducción de apoptosis.