INVESTIGADORES
BIANCIOTTI Liliana Graciela
congresos y reuniones científicas
Título:
Modulacion a largo plazo de la actividad y expresion de tirosina hidroxilasa (TH) por endotelinas 1 y 3 en el bulbo olfatorio (BO) de rata
Autor/es:
SABRINA NABHEN; AGUSTINA BATISTONE; JULIA GUIL; LILIANA G. BIANCIOTTI; MARCELO S. VATTA
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires
Reunión:
Congreso; Reunión Anual SAIC 2009; 2009
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
Los bulbos olfatorios (BOs) se relacionan con áreas del SNC
que regulan la función cardiovascular (NTS, sistema límbico e
hipotálamo) y expresan la enzima Tirosina Hidroxilasa (TH) que
está regulada a corto y a largo plazo por complejos mecanismos.
Las Endotelinas (ETs) y sus receptores también se encuentran en
esta región del SNC, sugiriendo su posible participación en la
regulación en dicha función biológica. El objetivo del presente trabajo
es estudiar los efectos de las ETs a largo plazo sobre la
actividad y expresión de la TH y los mecanismos intracelulares
involucrados. Los BOs se incubaron durante 240 min en ausencia
o presencia de ETs, de los antagonistas de los receptores de
ETs (ETA y ETB) y de inhibidores de vías intracelulares. Se determinó
la actividad de TH por método radioenzimático y los niveles
de proteína TH total y de los sitios fosforilados por Western Blot.
Los resultados se expresan como % vs control (ANOVA y test de
Student-Newman-Keuls, p<0.05; n: 5-8). Los resultados muestran
que ET-1 y ET-3 10 pM, incrementan la actividad de TH (44% y
52% vs. control, respectivamente), en presencia de BQ-610 (antagonista
del receptor ETA), la respuesta a ambas ETs disminuyó
(ET1+BQ-610:53% y ET3+BQ-610:65% vs. ET-1 y ET-3, respectivamente).
En presencia de antagonista de las vías intracelulares:
PKA, CAMK-II y PKC, la actividad de la TH decreció vs. ET-1 y
ET-3: H-89 500nM (ET1:39% y ET3:54%), KN-62 1 uM (ET1:64%
y ET3:72%), GF-109203x 100 nM (ET3:36%). Ambas ETs aumentaron
los niveles de proteína TH total (ET1:154% y ET3:104% vs.
control), pSer19(ET1:42% y ET3:54% vs. control), pSer31(ET1:44%
y ET3:33% vs. control) y pSer40(ET1: 80% y ET3: 85% vs. control).
Estos resultados nos permitieron concluir que las ETs incrementan
la actividad de TH a través del receptor ETA, activando la vía de
la PKA, CAMK-II y PKC (sólo en el caso de la ET-3) mediante un
aumento de los niveles de proteína TH total y de sus formas
fosforiladas: pSer19, pSer31 y pSer40.