EL SISTEMA DE DOS COMPONENTES NTRYX DE BRADYRHIZOBIUM DIAZOEFFICIENS USDA 110 ESTÁ INVOLUCRADO EN LA TOLERANCIA A ESTRESES

LAMELZA, FLORENCIA; ITURRALDE, ESTEBAN T.; HEGEL, VALERIA; LÓPEZ GARCÍA, SILVINA L.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología - CAM 2019. V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos - V CAMA. V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos - CLAMME 2019; 2019

Introducción y Objetivos: Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria del suelo capaz de establecersimbiosis con plantas de soja a través de la formación de nódulos en las raíces, dentro de los cuales este rizobioreduce el N2 atmosférico a NH4+, para luego suministrárselo a la planta. El establecimiento de una simbiosisefectiva está determinado por el estado fisiológico tanto de la bacteria como de la leguminosa hospedadora.Existen varios factores medioambientales que pueden afectar esta interacción y, en consecuencia, la actividadfijadora de N, entre los que podemos citar el estrés salino, osmótico, déficit hídrico, temperaturas y pHextremos, o la disponibilidad de nutrientes en el suelo. En este sentido, el estrés hídrico y salino constituyen losdos factores más limitantes en la producción agrícola. Para sobrevivir y adaptarse a los diferentes estresesambientales que soportan, las bacterias han desarrollado vías específicas de transducción de señales, entre lasque se destacan los sistemas de dos componentes. En particular, B. diazoefficiens expresa, entre otros sistemasde señalización, el sistema de dos componentes NtrYX, constituido por el sensor histidina quinasa NtrY, unaproteína transmembrana, y el regulador de respuesta NtrX. Recientemente, hemos observado que este sistemaparticipa en diversos procesos como la movilidad bacteriana, formación de biofilms, síntesis de exopolisacáridosy en la fijación de N2, aunque aún desconocemos los mecanismos moleculares de acción. En otras bacteriasestá reportado que NtrYX está vinculado a la tolerancia al estrés salino. Con la finalidad de continuar con lacaracterización del sistema, en este trabajo nos propusimos evaluar su implicancia en la tolerancia a diversosestreses ambientales.Materiales y Métodos: Para llevar a cabo nuestro objetivo, obtuvimos un mutante delecional en elgen ntrY mediante la técnica crossover PCR (denominado ?DELTA?ntrY), para luego evaluar su capacidad decrecimiento en medios a distintos pH, concentraciones salinas, compuestos tóxicos y déficit hídrico. Asimismo,nos propusimos estudiar el posible rol de la trehalosa como soluto osmoprotector en condiciones de estréssalino, evaluando la expresión relativa de genes involucrados en la biosíntesis de trehalosa y cuantificando laacumulación intracelular de dicho disacárido.Resultados: Observamos que el mutante ntrY fue capaz de tolerar el estrés oxidativo y ácido; mientras queresultó sensible frente al estrés salino, osmótico, toxicidad iónica y a la desecación. Por otra parte,encontramos que las vías de biosíntesis de trehalosa se encuentran inhibidas en el mutante, aunque el mismofue capaz de acumular este compuesto en niveles comparables a los de la cepa salvaje.Conclusiones: A partir de los resultados obtenidos podemos inferir que el sistema NtrYX de B.diazoefficiens USDA 110 actúa como un regulador global en respuesta a estreses, lo que resulta de interésagronómico en pos de producir mejoras en el proceso simbiótico con plantas de soja, aunque resta aúnprofundizar cómo es la cascada de señalización.