IBBM   21076
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA Y BIOLOGIA MOLECULAR
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Identificación y caracterización de proteínas que interactúan con la subunidad C del factor transcripcional PvNF-Y
Autor/es:
BATTAGLIA, MARINA; MAZZIOTA, LUCÍA; BLANCO, FLAVIO; ZANETTI, MARÍA EUGENIA; AGUILAR, O.
Lugar:
La Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2010
Resumen:
Las leguminosas pueden establecer relaciones simbióticas con bacterias del suelo, dando como resultado la formación de nódulos y la fijación de N2. Se ha reportado que las plantas de poroto (Phaseolus vulgaris) son noduladas preferencialmente por cepas de Rhizobium etli que provienen del mismo centro geográfico de domesticación (Aguilar et al. PNAS 101:13548). En un trabajo previo se identificaron genes de raíz de poroto mesoamericano que son regulados positivamente por cepas de la misma región (Peltzer Meschini et al. MPMI 21:4592). Uno de estos genes corresponde al gen PvNF-YC, que codifica para la subunidad C del factor transcripcional heterotrimérico NF-Y. La reducción de niveles de mRNA de PvNF-YC por RNAi en plantas compuestas de poroto produjo defectos en la iniciación y progresión de los hilos de infección, así como la reducción del número de nódulos. Con el objeto de identificar proteínas que interactúan con PvNF-YC se construyó una biblioteca de cDNA de raíces de poroto inoculadas con R.etli y se realizó un screening en el sistema de doble híbrido en levadura, utilizando PvNF-YC como carnada. A partir de los clones positivos se seleccionaron tres para su caracterización. Estos corresponden a un factor transcripcional con dominios de tipo GRAS, una tirosin-quinasa y una proteína con dominios LysM. Las interacciones están siendo validadas por retransformación y coinmunoprecipitación en levaduras y fluorescencia bi-molecular (BiF) en hojas de Nicotiana benthamiana. Paralelamente, la función de estos genes está siendo evaluada mediante silenciamiento mediado por RNAi y sobreexpresión. Estos estudios contribuirán a comprender las bases moleculares de la nodulación eficiente asociada a la preferencia de cepa surgida durante la coevolución entre los simbiontes.