IBBM   21076
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA Y BIOLOGIA MOLECULAR
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Proteoma de los cuerpos de oclusión del granulovirus de Epinotia aporema
Autor/es:
FERRELLI MARÍA LETICIA; PIDRE, MATÍAS LUIS; FABRE, MARÍA LAURA; MASSON, TOMÁS; ROMANOWSKI, VÍCTOR
Lugar:
Valle Hermoso, Cordoba
Reunión:
Congreso; XXXVIII REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL DE LA SAV; 2018
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Virología
Resumen:
La familia Baculoviridae comprende virus infectivos para invertebrados con un genoma DNA doble cadena circular cuyo tamaño es del orden de los 80-180 kpb y presentan una envoltura lipídica. Su tropismo de infección altamente específico ha impulsado su desarrollo como agentes de control biológico de insectos compatibles con el esquema del manejo integrado de plagas.Presentan dos morfologías diferenciadas aunque contienen el mismo genoma. En el ambiente se encuentran cuerpos de oclusión (OB: occlusion body), que contienen partículas virales envueltas e incluidas en una matriz proteica cuasicristalina; al ser ingeridos por el hospedador liberan los viriones derivados de los cuerpos de oclusión (ODV: occlusion derived virus) que infectan las células del epitelio intestinal. Esta infección produce en forma temprana los viriones brotantes (BV: budded virus), responsables de diseminar la infección hacia otros tejidos. El barrenador del brote (Epinotia aporema) es una plaga oligófaga que ataca los cultivos de soja. Un baculovirus altamente patógeno para esta especie, E. aporema granulovirus (EpapGV), ha sido descubierto y descrito por nuestro grupo. La interacción de los ODV con el epitelio intestinal determina el ingreso del virus al hospedador y el comienzo del proceso infectivo. En este trabajo, examinamos el contenido proteico de los OBs de EpapGV utilizando proteómica shotgun basada en espectrometría de masas (MS) Esta información nos ayudará a describir mejor la composición del virión e identificar componentes específicos de este virus.Los OB de EpapGV se obtuvieron a partir de larvas infectadas y se purificaron por ultracentrifugación en gradiente de sacarosa. Las partículas virales purificadas se redujeron con ditiotreitol, se alquiló con iodoacetamida y se digirió con tripsina. El equipo de MS empleado fue un Q-Exactive con Orbitrap y electrospray acoplado a un sistema de cromatografía líquida.El proteoma estructural de los OB de EpapGV está constituido por al menos 56 proteínas. Resulta interesante la presencia de dos péptidos localizados en la región intergénica de los genes epap48 y epap49, lo que sugiere la posible existencia de una proteína de fusión entre estos dos productos génicos. A través de una búsqueda proteogenómica pudimos detectar una región codificante no anotada que presenta ortología con ac110. Un análisis comparativo de los proteomas estructurales dentro de la familia Baculoviridae permitió identificar un conjunto de 33 proteínas conservadas.La composición proteica de los OB de EpapGV fue interrogada utilizando un enfoque proteómico basado en MS, que muestra un perfil de proteínas altamente conservado en la familia Baculoviridae. Nuestros datos resaltan la utilidad de la proteómica para caracterizar el complemento proteico de la partícula viral y la posibilidad de mejorar la anotación del genoma a través de la evidencia experimental de la traducción de las regiones codificantes.