IBBM 21076
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA Y BIOLOGIA MOLECULAR
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
LapD interacciona con la diguanilato ciclasa BdcA y con la posible diguanilato ciclasa BdcG
Autor/es:
SISTI F; FERNANDEZ J; AMBROSIS N
Lugar:
La Plata
Reunión:
Jornada; Jornadas de Fin de Año del Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; 2017
Institución organizadora:
Instituto de Biotecnología y Biología Molecular
Resumen:
El genoma de Bordetella bronchiseptica, patógeno respiratorio de una gran variedad de animales, presenta al menos 22 secuencias que podrían codificar para proteínas de síntesis, degradación y unión del segundo mensajero c-di-GMP. Esta molécula participa en la regulación de diversos fenotipos como formación de biofilm, movilidad, expresión de factores de virulencia, entre otros.Con el objetivo de avanzar en el estudio de c-di-GMP en la fisiología de B. bronchiseptica analizamos su rol en el control un grupo de proteínas asociadas a la formación de biofilm: LapD, LapG y BrtA. Según nuestra hipótesis, la localización de la adhesina BrtA está controlada mediante los niveles citoplasmáticos de c-di-GMP a través de un mecanismo mediado por LapD y LapG. Mediante ensayos de doble híbrido en bacterias demostramos que BdcA y BdcG interaccionan físicamente con LapD. De acuerdo a nuestra hipótesis de trabajo, en ausencia de DGC que alimenten con c-di-GMP a LapD, BrtA sería clivada de la superficie y la capacidad de formación de biofilm se vería reducida. Para probar nuestra hipótesis generamos las cepas ΔbdcA, ΔbdcG y ΔbdcAΔbdcG. Nuestros experimentos mostraron que ninguna de estas cepas presenta defectos en la formación de biofilm comparada con la cepa WT.En otro sentido, ha sido descripto recientemente que la presencia de seroalbúmina bovina (BSA) y calcio (Ca+2) en el medio de cultivo, aumenta la secreción de adenilato ciclasa, una toxina capaz de inhibir la formación de biofilm. Nuestros resultados indican que B. bronchiseptica posee una capacidad notablemente menor de formar biofilm en este medio. Además encontramos que la presencia de BSA y Ca aumenta los niveles de expresión y secreción de la adhesina BrtA. Aún resta por evaluar un posible vínculo entre los mecanismos de señalización disparados por BSA y calcio y c-di-GMP.
