Caracterización de la infección por virus Junín en monocitos y macrófagos humanos

GOMEZ RM; THOMAS P; CARRERA SILVA EA; FERRER MF

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Sociedad Argentina de Virología

El virus Junín (JUNV), miembro de la familia Arenaviridae, es el agente etiológico de la fiebre hemorrágica Argentina constituyendo una enfermedad endemo-epidémica que registra brotes epidémicos anuales ininterrumpidos. Al censar tempranamente la infección viral, las células macrofágicas poseen un rol crítico en las infecciones virales producidas por arenavirus, ya que se ha demostrado infección productiva y modulación de sus respuestas acorde a las propiedades patogénicas del arenavirus interviniente. El objetivo de este trabajo consistió en la caracterización virológica de la infección de monocitos y macrófagos humanos con la cepa atenuada Candid 1 (C#1) y la patogénica P de JUNV. Para ello, se utilizaron monocitos humanos CD14+ y macrófagos humanos diferenciados con 25 ng/ml de factor estimulante de colonias de macrófagos (MSCF). En ambos casos, las células se infectaron con las distintas cepas de JUNV (multiplicidad de infección=1) y se cuantificó la producción de virus infeccioso en función del tiempo, mediante titulación de su infectividad empleando ensayos de formación de placa. Los resultados obtenidos indican que los monocitos y los macrófagos humanos son susceptibles a la infección por JUNV por ambas cepas virales. Además, mediante citometría de flujo (FACS) se cuantificó el porcentaje de macrófagos infectados que coexpresan CD71 y proteínas anti-JUNV (46% y 45% para C#1 y P, respectivamente). A su vez, utilizando bacterias E. coli recombinantes para GFP y FACS se evaluaron la capacidad fagocítica de los macrófagos (66% y 75% para C#1 y P, respectivamente) y los niveles de expresión de CD14, CD80, CD86 y HLA-DR como moléculas marcadoras de activación macrofágica luego de la infección. Los resultados obtenidos indicaron que la infección con la cepa atenuada C#1 y la cepa patogénica P no alteran la capacidad fagocítica y aumentan el porcentaje de macrófagos activados. Ensayos en curso permitirán analizar los niveles de citoquinas claves presentes en los sobrenadantes de infección relacionados a la patogénesis de JUNV y se intentará esclarecer si existen diferencias en cuanto la replicación viral en monocitos y macrófagos humanos para las cepas C#1 y P.