Colonización de granos de arena por Bradyrhizobium diazoefficiens

GABRIELA LÓPEZ GUERRA; MARÍA JULIA ALTHABEGOITI; ANIBAL LODEIRO

Mar del Plata

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2018

CAMAYA

Bradyrhizobiumdiazoefficienses un rizobio frecuentemente aplicado como inoculante debido a su capacidad deestablecer una simbiosis fijadora de N2 con plantas de soja. Estemicroorganismo es un habitante normal de la microbiota del suelo, y por lotanto es capaz de desplazarse por natación entre los poros y colonizar lassuperficies de las partículas del suelo. Para caracterizar algunosdeterminantes bacterianos de estos procesos, en este trabajo estudiamos el rolde los flagelos y los polisacáridos extracelulares en la colonización de granosde arena.  Suspensiones de granos dearena en medio nutritivo se depositaron entre porta y cubreobjetos, seinocularon con rizobios y se mantuvieron en cámaras húmedas a 30°C por diversosperiodos. Las cepas de B. diazoefficiens utilizadasfueron marcadas con marcadores de fluorescencia, lo que permitió suvisualización microscópica sobre los granos de arena. A los 7 días deincubación, se observó la formación de pequeñas microcolonias. Luego, a partirde los 14 días, se observaron estructuras filamentosas de origen bacteriano queconectaban granos de arena próximos entre sí. Estas estructuras requirieron lapresencia de polisacáridos extracelulares, ya que mutantes incapaces desintetizarlos formaron escasos filamentos menos robustos. A tiempos mayores (21y 28 días) las colonias bacterianas formaron estructuras alargadas yramificadas, que requirieron la presencia de flagelos, puesto que mutantescarentes de los mismos fueron incapaces de generar estas ramificaciones. Estasobservaciones sugieren que hubo desplazamientos dependientes de flagelos sobrelas superficies de los granos de arena.Para estudiar la movilidadde los rizobios en los poros generados entre los granos de arena, empaquetamosarena en columnas saturadas de medio nutritivo líquido e inoculamos losrizobios en la parte superior. Los rizobios salvajes pudieron recuperarse delreservorio líquido en la base de la columna luego de 4 días, mientras quemutantes carentes de flagelos que fueron co-inoculados con los salvajes nopudieron recuperarse en ese tiempo o se recuperaron en mucha menor proporción,indicando que en ese lapso los rizobios salvajes se autopropulsaron entre losporos del sustrato.Estos resultados muestranque B. diazoefficiens es capaz demoverse entre y sobre los granos de arena, colonizarlos, e interconectarlos confilamentos que al menos en parte estarían formados por polisacáridosextracelulares bacterianos.