IBBM   21076
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA Y BIOLOGIA MOLECULAR
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
PROTEOMA DE LOS VIRIONES DERIVADOS DE OCLUSIÓN (ODV) DEL GRANULOVIRUS DE SPODOPTERA FRUGIPERDA (SFGV)
Autor/es:
FABRE MARÍA LAURA; ROMANOWSKI VÍCTOR; FERRELLI MARÍA LETICIA; MASSON TOMÁS; PIDRE MATIAS LUIS
Reunión:
Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017
Resumen:
La familia Baculoviridae comprende virus infectivos para invertebrados con un genoma DNA doble cadena circular cuyo tamaño es del orden de los 80-180 kpb y presentan una envoltura lipídica. Su tropismo de infección altamente específico ha impulsado su desarrollo como agentes de control biológico de insectos compatibles con el esquema del manejo integrado de plagas. Presentan dos morfologías diferenciadas aunque contienen el mismo genoma. En el ambiente se encuentran cuerpos de oclusión (OB), que contienen partículas virales envueltas e incluidas en una matriz proteica cuasicristalina; al ser ingeridos por el hospedador liberan los viriones derivados de los cuerpos de oclusión (ODV) que infectan las células del epitelio intestinal. Esta infección produce en formatemprana los viriones brotantes (BV), responsables de diseminar la infección hacia otros tejidos. En particular estamos interesados en el estudio y desarrollo de biopesticidas basados en los virus que afectan al gusano cogollero (Spodoptera frugiperda) conocido como Spodoptera frugiperda Granulovirus (SfGV) y Spodoptera frugiperda Multiple Nucleopolyhedrovirus (SfMNPV). SfGV pertenece al género Betabaculovirus y se ha propuesto como potenciador de la infección por SfMNPV. La interacción de los ODV con el epitelio intestinal determina el ingreso del virus al hospedador y el comienzo del proceso infectivo. Para el mejoramiento del virus como biopesticida, es de gran interés conocer la base de estas interacciones. Por ello nos propusimos evaluar la composiciónproteica de los ODV de SfGV empleando la espectrometría de masas (MS) como herramienta analítica. Los OB de SfGV se obtuvieron a partir de larvas infectadas y se purificaron por ultracentrifugación en gradiente de sacarosa. Las proteínas totales se cuantificaron mediante un ensayo de Bradford. Previo al análisis por MS la muestra de proteínas se redujo con ditiotreitol, se alquiló con iodoacetamida y se digirió con tripsina. El equipo de MS empleado fue un Q-Exactive con Orbitrap y electrospray acoplado a un sistema de cromatografía líquida. En un primer análisis exploratorio pudimos identificaron 34 proteínas, de las cuales 33 están codificadas por el virus y una por el hospedador; 9 de las proteínas pertenecen a un grupo conservado entre todos los baculovirus (core genes) y 11 solo fueron encontradas en los betabaculovirus; una de ellas es exclusiva de SfGV. Además se encontraron dos enhancins (metaloproteasas asociadas con el efecto potenciador de la infección por NPVs). Estos resultados preliminares demuestran que es factible analizar los ODV de SfGV mediante MS. Apuntamos a llevar a cabo estudios de proteómica comparativa con los dos proteomas publicados de betabaculovirus y, a partir de estas comparaciones, aspiramos a orientar los estudios sobre los componentes del virus que forman parte de la maquinaria relevante para la infección de los ODV de este grupo.