CITRUS PSOROSIS VIRUS INTERFIERE CON EL PROCESAMIENTO Y ACUMULACIÓN DE miRNAs CONSERVADOS EN PLANTAS DE NARANJO DULCE

MARMISOLLÉ F; REYES CA; GARCIA ML

Simposio; Simposio de Genómica Funcional de Plantas; 2017

Los miRNAs son moléculas esenciales en el silenciamiento de genes de muchos organismos eucarióticos. En plantas, estas moléculas modulan la homeostasis mediante la inactivación de mRNA targets y se los ha visto involucrados en la expresión de síntomas y la defensa de la planta.Se ha demostrado que las proteínas 24K y 54K de Citrus psorosis virus (CPsV) tienen actividad de supresión del mecanismo de silenciamiento génico post-transcripcional (PTGS). Además, se observó que la infección con CPsV provocó una regulación negativa en la acumulación de un grupo de miRNAs conservados en plantas de naranjo.En este trabajo, se analizó la acumulación diferencial de un conjunto de precursores de miRNA (pre-miRNA) conservados (156a, 167d, 171a y 172a) en tejidos de naranjo infectado con dos aislamientos de CPsV y sanos. Dichos pre-miRNAs presentaron una acumulación aumentada en muestras infectadas respecto de sanas. Se estudió también la acumulación del pri-miR156a, observándose que no existe una acumulación diferencial en plantas infectadas respecto de sanas.Además, se investigaron posibles interacciones de las proteínas virales (expresadas transitoriamente en N. benthamiana) con los pre-miRNAs mediante la metodología de RNA immunoprecipitation (RIP). La proteína 24K de CPsV demostró interaccionar directa o indirectamente con los pre-miRNAs estudiados, pudiendo ser la responsable del procesamiento anormal. Así mismo, se están analizando posibles interacciones de las proteínas virales con proteínas de la maquinaria celular (DCL1, HYL1 y SE) en N. benthamiana mediante evaluación de su co-localización celular por microscopía confocal y posteriormente se corroborará por Co-Inmunoprecipitación y Bi-molecular fluorescence complementation (BiFC).