Variedades cítricas transgénicas resistentes a psorosis y estrategias de transmisión de la resistencia a copas no transgénicas

DE FRANCESCO A; REYES CA; COSTA N; GARCIA ML

Congreso; VIII Congreso Argentino de Citricultura; 2015

IntroducciónLa psorosis de los cítricos es una enfermedad muy antigua y ampliamente distribuida en el mundo. En nuestro país ha causado grandes pérdidas económicas durante décadas, llegando a ser endémica en el NEA. El agente causal es Citrus psorosis virus (CPsV), miembro tipo del género Ophiovirus, familia Ophioviridae. Existen evidencias de difusión natural de este virus en Argentina y Uruguay, y no se conocen variedades naturalmente resistentes a psorosis, por lo que una de las estrategias más eficientes para alcanzar el control de la enfermedad es la generación de plantas cítricas resistentes a CPsV, mediante transgénesis utilizando genes del virus.MetodologíaSe obtuvieron plantas transgénicas de Citrus sinensis (Naranjo Dulce Pineapple, NDP), que expresan un fragmento del gen de la proteína de cubierta viral (CP), mediante transformación de segmentos internodales jóvenes de NDP con Agrobacterium tumefaciens. Estas líneas transgénicas, llamadas ihpCP, fueron propagadas por injerto sobre pies de C. jambhiri (Limón Rugoso, LR). Estas plantas LR/ihpCP fueron desafiadas en la copa ihpCP con CPsV mediante injerto de un segmento de corteza infectada con el virus. Se analizó el desarrollo de la infección en la copa ihpCP por sintomatología, TAS-ELISA y RT-PCR. En otro ensayo, se generaron plantas triples con un pie de LR, un puente de ihpCP y una copa NDP no transgénica (plantas LR/ihpCP/NDP). Se ensayaron dos de las líneas ihpCP como puente, y éstas fueron inoculadas en el tejido transgénico. Las copas NDP fueron injertadas antes y después de inocular con CPsV. La presencia del virus se analizó en el puente y en la copa.ResultadosLas plantas LR/ihpCP fueron resistentes a CPsV, ya que no presentaron síntomas de psorosis, ni se detectó CPsV al cabo de 3 brotaciones sucesivas. Dos de las líneas ihpCP fueron analizadas 2 años post-inoculación, y una de las líneas fue resistente, mientras que la otra quebró parcialmente la resistencia.Las plantas LR/ihpCP/NDP, fueron inoculadas en dos momentos diferentes: A) se inoculó el puente después que se injertó la copa NDP sobre el tejido ihpCP, y B) se inoculó el puente antes que se injertara la copa NDP. En el caso A, las plantas no presentaron síntomas ni se detectó el virus al cabo de dos brotaciones, tanto en el puente ihpCP como en la copa NDP. En el caso B, el puente permaneció resistente pero la copa NDP no transgénica no mostró resistencia. Esto indica que la resistencia que posee el puente ihpCP puede ser transmitida a la copa de NDP no transgénica, sólo si la copa es injertada antes de la exposición a la infección viral.ConclusiónSe han desarrollado plantas de NDP transgénicas que son resistentes a CPsV en condiciones de invernáculo. Esta resistencia puede conferirse a una copa no transgénica, cuando el tejido ihpCP es utilizado como puente. Debido a que la copa no es transgénica, esta estrategia tendría mayor aceptación en el mercado. El próximo paso son los ensayos a campo, donde tanto el pie como la copa sea una variedad no transgénica, y como ?puente? se utilice la línea que confiere resistencia a CPsV.