LA AUTOFAGIA CELULAR PARTICIPA EN LA REPLICACIÓN DEL VIRUS JUNÍN.

PEREZ VIDAKOVICS, MARIA LAURA; URE, AGUSTÍN E.; POZNER, ROBERTO G.; GÓMEZ, RICARDO M

Buenos Aires

Congreso; XI CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA 2015 - II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

Sociedad Argentina de Virología

p { margin-bottom: 0.1in; line-height: 120%; }La autofagia es un mecanismo de degradación constitutivo fundamental en la homeostasis celular que participa en la remoción de organelas y agregados citoplasmáticos proteícos. Paralelamente, forma parte integral de la respuesta inmune innata y adaptativa al participar en la detección de virus e inducción de defensas antivirales. En contraparte, los virus han desarrollado estrategias que alteran la autofagia y promueven uno o varios de los estadios de su ciclo viral. La familia Arenaviridae está compuesta por virus RNA siendo varios de ellos responsables de fiebres hemorrágicas (FH) mortales en humanos. En nuestro país, el virus Junín (JUNV) provoca la FH Argentina (FHA), una enfermedad endemo-epidémica con una tasa de mortalidad de 20%. Actualmente5 millones de individuos se consideran en riesgo de contraer FHA. Para evaluar si la infección con JUNV utiliza la autofagia durante su ciclo replicativo, se realizaron experimentos in vitro en célulasA549 y Vero infectadas con JUNV. Cuando la autofagia celular se activa, la proteína citoplasmática LC3I es lipidada y se incorpora a la membrana del autofagosoma (LC3II). Mediate estudios de microscopía confocal se observó la colocalización de JUNV con el principal marcador de autofagosomas LC3II. Muestras proteícas de experimentos realizados en paralelo y analizadas mediante Western blot permitieron constatar un incremento en la expresión de LC3II en células infectadas con JUNV a partir de las 24 h post-infección. La presencia de bafilomicina A1, un inhibidor de la acidificación lisosomal que impide la maduración autofágica, afectó la capacidad de JUNV de infectar células A549 y en consecuencia se observó una disminución de la acumulación de agregados de LC3II. La inhibición de la autofagia también afectaría la replicación y brotación de JUNV, ya que se observó una disminución en el título viral cuantificado en los sobrenadantes de los cultivos de células A549 infectados en presencia de bafilomicina A1. Paralelamente, se observó mayor título viral en el sobrenadante de células pre-tratadas con rapamicina, un inductor de la autofagia celular, e infectadas con JUNV. Nuestro resultados preliminares indican que la autofagia celular participa en la replicación de JUNV. Las células infectados con el virus muestran un incremento de agregados de la proteína LC3II asociada a vesículas autofágicas. Además, la presencia de un inhibidor de autofagia afecta la replicación viral,mientras que se observa un mayor título viral en presencia de rapamicina, un inductor de autofagia celular. Futuros experimentos nos permitirán conocer los mecanismos moleculares involucrados en la manipulación de la autofagia celular durante la infección por JUNV. Se espera que nuestros estudios permitan el desarrollo de nuevas estrategias preventivas y terapéuticas contra la FHA así como contra otras FH arenavirales.