Caracterización funcional de un factor de transcripción de la familia GRAS en la asociación simbiótica Phaseolus vulgaris-Rhizobium etli.

JOAQUÍN CLÚA, MARINA BATTAGLIA, O. MARIO AGUILAR, FLAVIO BLANCO Y MARÍA EUGENIA ZANETTI

Mar del Plata

Congreso; XXIX Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2012

SAFV

Las leguminosas tienen un alto interés agronómico, ya que aportan gran cantidad de nitrógeno al suelo como consecuencia de su asociación simbiótica con bacterias del género Rhizobium. Esta  asociación da lugar a la formación de un nuevo órgano en la raíz llamado nódulo, donde las bacterias se alojan y convierten el nitrógeno atmosférico a formas asimilables para la planta. Nuestro objetivo es dilucidar las bases moleculares que llevan a una nodulación más eficiente, utilizando como sistema de estudio la simbiosis entre la leguminosa Phaseolus vulgaris y Rhizobium etli. Uno de los genes de la planta necesarios para una nodulación eficiente es un factor nuclear denominado NF-YC1. Con el fin de identificar nuevos componentes moleculares involucrados en este proceso, se buscaron proteínas que interaccionen con NF-YC1 mediante un screenig de una biblioteca de doble híbrido de levadura. Esta estrategia nos permitió aislar un gen perteneciente a la familia de factores de transcripción GRAS, al que denominamos SIN-1 (Scarecrow-like Involved in Nodulation 1). El análisis filogenético de la familia génica GRAS de P. vulgaris mostró que SIN-1 pertenece a la subfamilia PAT-1 descrita previamente en Arabidopsis thaliana. Estudios de expresión mediante qRT-PCR indicaron que los transcriptos de SIN-1 se acumulan a mayores niveles en nódulos de 14 días post-inoculación respecto de otros órganos. Posteriormente, se abordó la caracterización funcional de SIN-1 mediante una estrategia de genética reversa. Tanto el silenciamiento post-transcripcional mediado por RNAi como la sobreexpresión de SIN-1 en raíces de P. vulgaris, mostraron una reducción del número y tamaño de los nódulos, pero no afectaron el número ni la progresión de los eventos de infección. Estos resultados  sugirien que SIN-1 participa en la organogénesis y el desarrollo del nódulo, y que se requiere una fina regulación de sus niveles de expresión durante estos procesos.