Aislamiento e identificación de bacterias que colonizan el interior de semillas de Medicago sativa (alfalfa).

LÓPEZ, JOSÉ LUIS; GIUSTI MARÍA DE LOS ÁNGELES; MARTINI MARÍA CARLA; SALAS MARÍA EUGENIA; LOZANO MAURICIO; DEL PAPA MARÍA FLORENCIA; PISTORIO MARIANO ; ANTONIO LAGARES.

Mar del Plata

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología General, SAMIGE; 2012

SAMIGE

En la actualidad el uso de microorganismos benéficos como biofertilizantes es una práctica creciente  orientada a la mejora de los rendimientos de los cultivos, incluyendo las prácticas agrícolas intensivas. Además del empleo de rizobios fijadores de nitrógeno aplicables a leguminosas; el uso de biofertilizantes se extiende a la aplicación de distintos microorganismos que, desde la rizósfera o como endófitos, mejoran la sanidad y/o el crecimiento vegetal. Tales microorganismos, conviven en los ambientes naturales con las plantas que colonizan y de las que han sido aislados. Un punto de especial interés refiere al hecho de que, más allá de los microorganismos que desde el suelo puedan colonizar la planta, las propias semillas son en varios casos portadoras (en su interior) de una diversidad microbiana importante cuyo rol en las etapas tempranas del crecimiento vegetal no ha sido aun estudiado en detalle.Como parte de los estudios vinculados a la microbiota asociada a alfalfa que realizamos en nuestro laboratorio, hemos comenzado a investigar la diversidad bacteriana presente en el interior de las semillas de esta especie en las que se había reportado la existencia de Erwinia herbicola (Handelsman y Brill, 1985). Para investigar la presencia de bacterias cultivables dentro de semillas de alfalfa (variedad Monarca -INTA), las mismas fueron esterilizadas superficialmente 10 min. con hipoclorito de sodio (9 g Cl2/l) o 10 min. con ácido sulfúrico oleoso (98% P/P); lavadas con agua estéril y PBS pH =7; y las bacterias liberadas luego de 4 hs en PBS fueron analizadas por plaqueo en medios agarizados (LB, TSA, ELM). La amplificación por PCR y posterior secuenciamiento de una región parcial del rDNA 16S realizado a partir de diferentes aislamientos obtenidos, reveló la presencia de los siguientes géneros: Arthrobacter, Bacillus, Enhydrobacter, Janibacter, Kokuria, Microbacterium, Moraxella, Paenibacillus, Rhizobium, Sphingomonas, y Streptomyces. Además, bacterias de 6 de estos géneros pudieron ser recuperadas ya sea de la raíz o de la parte aérea de plantas crecidas en vermiculita con medio mineral, sugiriendo que las propias semillas pueden haber sido la fuente de las bacterias endófitas con que fueron colonizadas. La mayoría de las bacterias presentes en la parte aérea también fueron recuperadas de raíces y de semillas. Bacterias de los generous Corynebacterium, Exiguobacterium, and Flavobacterium pudieron sólo ser aisladas de raíces. En clones representantes de los diferentes géneros que colonizan alfalfa hemos comenzado a investigar si los mismos expresan características fenotípicas asociadas a la promoción del crecimiento vegetal y al biocontrol.