OBTENCIÓN DE BACULOVIRUS DE ANTICARSIA GEMMATALIS RECOMBINANTES CONTENIENDO EL GEN DE UNA TOXINA DE INSECTOS Y EVALUACIÓN DE SU CAPACIDAD BIOINSECTICIDA

HAASE SANTIAGO; FERRELLI MARÍA LETICIA; SALVADOR RICARDO; PIDRE MATÍAS LUIS; BERRETTA MARCELO FACUNDO; SCIOCCO-CAP ALICIA; ROMANOWSKI VÍCTOR

Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

Sociedad Argentina de Virología

Introducción Los bioinsecticidas constituyen una de las herramientas más convenientes para desarrollo de una agricultura sustentable, debido a su escaso grado de impacto ambiental. Entre los candidatos a bioinsecticidas, los baculovirus representan una alternativa promisoria, debido a su alta virulencia y especificidad. El nucleopoliedrovirus de Anticarsia gemmatalis, AgMNPV, es el virus más utilizado como bioinsecticida y es aplicado para el control de su hospedador, Anticarsia gemmatalis (la oruga de las leguminosas), una importante plaga de la soja. Sin embargo, en regiones templadas presenta algunas desventajas, entre ellas, el tiempo de acción relativamente lento. Esto ha motivado el desarrollo de AgMNPV recombinantes con modificaciones destinadas a disminuir el tiempo de acción del virus. La estrategia de modificación genética del virus se basa en la doble recombinación homóloga entre el genoma viral linealizado y un vector de transferencia que contiene el gen de la proteína a expresar bajo el control del promotor viral de poliedrina. Objetivo Generación de AgMNPV recombinantes y evaluación de su capacidad bioinsecticida Materiales y métodos Se desarrolló el vector de transferencia pI3, en el cual se introdujo el ORF de una toxina específica de insectos (tox34), proveniente del ácaro Pyemotes tritici. El DNA plasmídico pI3-tox34 se cotransfectó con el DNA viral linealizado en células Hi5. Una vez que se observó la producción de poliedros en el cultivo celular, éste fue utilizado para la infección per os de larvas de A. gemmatalis, conduciendo a la generación del baculovirus AgMNPV-tox34-polh(+). Además, se dispone de un virus recombinante que expresa la misma toxina pero que no expresa la poliedrina y por lo tanto no genera cuerpos de oclusión (AgMNPV-tox34-polh(-)). Se analizó la expresión de la proteína recombinante mediante SDS-PAGE en ambos virus, y se comprobó su acción a través de la inyección de larvas de Anticarsia gemmatalis. Finalmente se realizó un bioensayo por administración oral comparando los parámetros bioinsecticidas de AgMNPV-tox34 con el virus salvaje. Conclusiones Se comprobó la capacidad de la toxina como incrementador de los efectos bioinsecticidas de AgMNPV, por vía intrahemocélica y por administración oral.