Caracterización de la interferencia de la señalización del receptor a glucocorticoides por parte del receptor H1 a histamina

ZAPPIA C; GRANJA GALEANO G; ALONSO N; SHAYO C; DAVIO C; FITZSIMONS CP; MONCZOR F

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología 2011 y el II Congreso Nacional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laborat; 2011

SAIC

Diversos reportes indican la interacción entre la señalización de receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) y el receptor a glucocorticoides (GR). El objetivo del presente trabajo es estudiar la modulación de la actividad del GR por parte de ligandos del receptor H1 a histamina (rH1, un GPCR acoplado a Gq/11). Para ello se cotransfectaron células HEK293T con el rH1, el GR, y un sistema reportero TAT3-LUC. En dicho sistema el tratamiento con histamina 100 µM inhibe significativamente la respuesta a dexametasona 100 nM (50±5%). Este fenómeno es revertido tanto por antagonistas del rH1 (mepiramina y triprolidina) como por la sobreexpresión de GRK3 (una kinasa involucrada en la desensibilización del rH1). Evidencias recientes sugieren que, tanto miembros de las cascadas clásicas de señalización (PLC/PKC) como la disponibilidad de subunidades Gβ/γ de las proteínas G, regulan la actividad del GR. Nuestros resultados muestran que el inhibidor de PLC, U73122, es capaz de revertir el efecto de histamina sobre la activación del GR, mientras que el dominio de homología pleckstrin de GRK2, secuestrador de subunidades Gβ/γ, no lo revierte, sugiriendo la participación de los efectores clásicos de señalización. Por otra parte, dado que el GR transloca al núcleo para ejercer sus efectos transcripcionales, se cotransfectaron las células con el rH1 y una quimera fluorescente YFP-GR. En estudios de microscopía, se observa que dexametasona 100 nM promueve la translocación del GR al núcleo, tanto en ausencia como en presencia de histamina 100 µM, indicando que si bien la histamina interfiere en la actividad del GR, no lo hace a este nivel. Nuestros resultados muestran una clara modulación de la actividad del GR por parte del rH1, lo cual resulta relevante considerando que los blancos terapéuticos con mayor cantidad de drogas aprobadas por la FDA son el rH1 y el GR, y además, existen numerosas situaciones en las que ligandos de ambos sistemas son administrados en forma conjunta